[发明专利]表达多基因抗流感转基因动物的构建方法在审
申请号: | 201510816345.9 | 申请日: | 2015-11-19 |
公开(公告)号: | CN106381296A | 公开(公告)日: | 2017-02-08 |
发明(设计)人: | 孟庆文;王伟;陈洪岩 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;C12N15/873;A01K67/027 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司31266 | 代理人: | 陈详,刘妍珺 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明提供了一种表达多基因抗流感转基因动物的构建方法。该方法在RNA聚合酶Ⅲ型启动子h7SK、hH1、hU6和mU6的控制下,靶向流感病毒基因构建了串联表达的shRNA表达盒,将Mx-RNAis与shRNA表达盒联合构建到表达载体并包装重组慢病毒,制备转基因动物获得表达抗流感基因的转基因动物。实验结果表明转基因动物具有显著抑制猪流感病毒复制的活性。 | ||
搜索关键词: | 表达 多基因 流感 转基因 动物 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种shRNA构建物,其特征在于,所述shRNA构建物包括第一siRNA编码序列,所述第一siRNA特异性靶向流感病毒PB1基因或其片段;优选地,所述第一siRNA的编码序列包括核苷酸序列SEQ ID NO.:13;更优选地,所述第一siRNA的编码序列含有式Ia所示的结构:Seq正向a‑Xa‑Seq反向a 式Ia式中,Seq正向a核苷酸序列如SEQ ID NO.:13所示;Seq反向a为与Seq正向a基本上互补的核苷酸序列;Xa为位于Seq正向a和Seq反向a之间的间隔序列,并且所述间隔序列与Seq正向a和Seq反向a不互补;最优选地,所述第一siRNA的编码序列还包含与式Ia序列可操作性连接的hH1启动子序列。
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