[发明专利]一种快速测定雨生红球藻孢子破壁率的方法

摘要

本发明公开了一种快速测定雨生红球藻孢子破壁率的方法，其步骤是A、丙酮提取、测定已知样品的虾青素吸光度，B、对已知样品研磨、匀浆使其破壁率达到100%后用丙酮提取、测定100%破壁样品的虾青素吸光度，丙酮提取、测定已知样品的虾青素吸光度（吸光值A1）和对已知样品研磨、匀浆使其破壁率达到100%后用丙酮提取、测定100%破壁样品的虾青素吸光度（吸光值A2）的比例，即孢子破壁率；本发明方法操作仅须三个步骤，操作简单、计算简便（不需要算出虾青素的实际含量，仅需将2个样品吸光度A1和A2相除得到对应的比例结果）、高效快捷（全过程约15-20分钟），非常适合雨生红球藻制品生产加工过程的实时监控和质量控制。

主权项

一种快速测定雨生红球藻孢子破壁率的方法，其步骤是：A、丙酮提取、测定已知样品的虾青素吸光度：精确称取定量雨生红球藻样品置于100ml容量瓶中，加入丙酮100ml定容至刻度，在室温（20‑25℃）下萃取5‑15分钟，充分振荡使虾青素充分析出，将上述溶液转移至离心管，用3500‑5000rpm离心2‑5分钟，使溶液和藻渣分离，取离心后上清液5ml转移至100ml容量品，丙酮定容至100ml（即稀释20倍），用紫外分光光度计（1cm光径比色杯，以丙酮为空白对照溶液）测量475nm波长光吸光度A1；B、对已知样品研磨、匀浆使其破壁率达到100%后用丙酮提取、测定100%破壁样品的虾青素吸光度：精确称取定量雨生红球藻样品（上述相同样品）置于试管分散机中，加入少量丙酮（2‑5ml），5000‑10000rpm研磨5分钟（或组织匀浆机10000‑15000转匀浆5分钟或充分研磨），将分散试管内的混合样品转移至100ml容量瓶中，用丙酮将附着的色素完全洗脱直至无色，并将全部液体转移到容量瓶中，加入丙酮100ml定容至刻度，在室温（20‑25℃）下萃取5‑15分钟，充分振荡使虾青素充分析出，将上述溶液转移至离心管，用3500‑5000rpm钟离心2‑5分钟，使溶液和藻渣分离，取离心后上清5ml转移至100ml容量品，丙酮定容至100ml（稀释20倍），用紫外分光光度计（1cm光径比色杯，以丙酮为空白对照溶液）测量475nm波长光吸光度A2；C、计算孢子破壁率丙酮提取、测定已知样品的虾青素吸光度（吸光度值A1）和对已知样品研磨、匀浆使其破壁率达到100%后用丙酮提取、测定100%破壁样品的虾青素吸光度（吸光度值A2）的比例，即孢子破壁率；用公式计算孢子破壁率（A）：A = A1/A2×100%。