[发明专利]一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法有效
| 申请号： | 201510854258.2 | 申请日： | 2015-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN106814128B | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 钱昆;刘彬 | 申请（专利权）人： | 浙江亿纳谱生命科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N27/64 | 分类号： | G01N27/64 |
| 代理公司： | 31220 上海旭诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 310052 浙江省杭州市滨江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，包括以下步骤：仪器与试剂的准备；制备含铁氧化物纳米颗粒基质；制备外泌体样品，分别取不同比例稀释后的外泌体样品点样在靶板上，室温下干燥；在外泌体样品上点含铁氧化物纳米颗粒基质，室温下干燥；进行质谱检测并对质谱检测结果进行分析，得出结论。该方法采用微纳颗粒材料作为基质，能够在质谱分析中快速、高效的使用极少量的生物样品实现待测分子的定性与定量检测；同时可以去除传统基质的背景干扰和热点效应，实现外泌体样本中代谢分子的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 检测 外泌体小 分子 代谢物 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1：仪器与试剂的准备：激光解析电离质谱，正离子模式检测，只有信噪比大于10的质谱信号用于定性和定量分析；/n步骤2：制备含铁氧化物纳米颗粒基质，所述含铁氧化物纳米颗粒基质的制备包括以下步骤：/n2.1：将三氯化铁和柠檬酸三钠溶解在乙二醇溶液中；/n2.2：在上述的混合溶液中加入乙酸钠，并在室温下超声半小时直到溶液变成均相体系；/n2.3：反应在铁氟龙高压反应釜中进行，150-195摄氏度条件下反应8小时以上，从而形成含铁氧化物纳米颗粒；/n2.4：将步骤2.3中得到的所述含铁氧化物纳米颗粒用乙醇和去离子水反复冲洗，最后在62～70摄氏度下干燥以备使用；/n2.5：将所述含铁氧化物纳米颗粒重悬在去离子水中，作为基质使用；/n步骤3：提取外泌体，将稀释后的外泌体样品点样在靶板上，室温下干燥；/n步骤4：在所述外泌体样品上点所述含铁氧化物纳米颗粒基质，室温下干燥；/n步骤5：对步骤4中得到的外泌体样品进行质谱检测；/n步骤6：对质谱检测结果进行分析，得出结论；/n其中，检测的分子包括糖类和氨基酸，检测分子量范围为小于等于10000D；/n所述含铁氧化物纳米颗粒基质的直径小于1μm，颗粒粒度均一，所述含铁氧化物纳米颗粒基质具有粗糙表面；/n所述含铁氧化物纳米颗粒基质为Fe
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