[发明专利]基于荧光染料法数字微滴PCR检测血液中结核杆菌的方法在审
| 申请号： | 201510873897.3 | 申请日： | 2015-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN105296663A | 公开（公告）日： | 2016-02-03 |
| 发明（设计）人： | 柳爱华;宝福凯;杨佳儒;韩欣霖;徐翠平;陶律延;彭芸;麻明彪 | 申请（专利权）人： | 昆明医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/06 |
| 代理公司： | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650500 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于荧光染料法数字微滴PCR检测血液中结核杆菌的方法，在于，包括以下步骤：步骤(1)采集血液，提取血液中的总DNA；步骤(2)将总DNA进行数字微滴PCR反应，反应结束后，检测所有微滴的荧光信号值并设定阈值，根据荧光信号的阈值确定微滴是否包裹结核杆菌DNA，高于阈值的微滴包裹结核杆菌DNA，为阳性微滴，低于阈值的微滴不包裹结核杆菌为阴性微滴；步骤(3)统计阳性微滴数，计算得出结核杆菌DNA的拷贝数，继而得到血液中结核杆菌DNA的总拷贝数。本发明提供的方法取样方便快捷，仅需采集微量血液即可检测出微量结核菌的存在，灵敏度高，检测快速，仅需2小时就可完成检测过程。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 荧光 染料 数字 pcr 检测 血液 结核杆菌 方法 | ||
【主权项】：
一种基于荧光染料法数字微滴PCR检测血液中结核杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)采集血液，提取血液中的总DNA；步骤(2)将总DNA进行数字微滴PCR反应，反应结束后，检测所有微滴的荧光信号值并设定阈值，根据阈值确定微滴是否包裹结核杆菌DNA，高于阈值的微滴包裹结核杆菌DNA，为阳性微滴，低于阈值的微滴不包裹结核杆菌DNA为阴性微滴；步骤(3)统计阳性微滴数，计算得出结核杆菌DNA的拷贝数，继而得到血液中结核杆菌DNA的总拷贝数，从而判断血液中是否含有结核杆菌。
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