[发明专利]灵芝漆酶毕赤酵母基因工程菌株的构建与应用在审

专利信息
申请号: 201510876149.0 申请日: 2015-12-03
公开(公告)号: CN105349558A 公开(公告)日: 2016-02-24
发明(设计)人: 周选围;徐慧;白晓慧;郭梦圆;高艳华 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/02;C12R1/84
代理公司: 上海交达专利事务所 31201 代理人: 王毓理;王锡麟
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 一种灵芝漆酶毕赤酵母基因工程菌株的构建与应用,通过从灵芝中克隆出漆酶基因GlLac,经EcoRI和XbaI双酶切后克隆入毕赤酵母表达质粒并构建出表达载体,最后将其电转化入毕赤酵母表达宿主菌中,经培养扩增和筛选后得到毕赤酵母工程菌。本发明构建了灵芝漆酶(Lac)的酵母分泌型共表达载体pPICZαA-GlLac,并转化毕赤酵母(Pichia pastoris)X33,通过挑选高博莱霉素(Zeocin)抗性的重组子作为毕赤酵母工程菌。毕赤酵母的胞外表达载体pPICZαA是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体,能表达高拷贝的基因。
搜索关键词: 灵芝 漆酶毕赤 酵母 基因工程 菌株 构建 应用
【主权项】:
一种灵芝漆酶基因GlLac酵母工程菌株的构建,其特征在于,通过从灵芝中克隆出漆酶基因GlLac,经EcoRI和XbaI双酶切后克隆入毕赤酵母表达质粒并构建出表达载体,最后将其电转化入毕赤酵母表达宿主菌中,经培养扩增和筛选后得到毕赤酵母工程菌;所述的灵芝漆酶基因GlLac的核苷酸序列如Seq ID.No.1所示。
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