[发明专利]灵芝漆酶毕赤酵母基因工程菌株的构建与应用在审
申请号: | 201510876149.0 | 申请日: | 2015-12-03 |
公开(公告)号: | CN105349558A | 公开(公告)日: | 2016-02-24 |
发明(设计)人: | 周选围;徐慧;白晓慧;郭梦圆;高艳华 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/02;C12R1/84 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人: | 王毓理;王锡麟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种灵芝漆酶毕赤酵母基因工程菌株的构建与应用,通过从灵芝中克隆出漆酶基因GlLac,经EcoRI和XbaI双酶切后克隆入毕赤酵母表达质粒并构建出表达载体,最后将其电转化入毕赤酵母表达宿主菌中,经培养扩增和筛选后得到毕赤酵母工程菌。本发明构建了灵芝漆酶(Lac)的酵母分泌型共表达载体pPICZαA-GlLac,并转化毕赤酵母(Pichia pastoris)X33,通过挑选高博莱霉素(Zeocin)抗性的重组子作为毕赤酵母工程菌。毕赤酵母的胞外表达载体pPICZαA是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体,能表达高拷贝的基因。 | ||
搜索关键词: | 灵芝 漆酶毕赤 酵母 基因工程 菌株 构建 应用 | ||
【主权项】:
一种灵芝漆酶基因GlLac酵母工程菌株的构建,其特征在于,通过从灵芝中克隆出漆酶基因GlLac,经EcoRI和XbaI双酶切后克隆入毕赤酵母表达质粒并构建出表达载体,最后将其电转化入毕赤酵母表达宿主菌中,经培养扩增和筛选后得到毕赤酵母工程菌;所述的灵芝漆酶基因GlLac的核苷酸序列如Seq ID.No.1所示。
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