[发明专利]一种基于酶催化还原氯金酸的葡萄糖氧化酶电极制备方法

摘要

本发明公开了一种基于酶催化还原氯金酸的葡萄糖氧化酶电极制备方法。以Pt电极为基底电极，通过吸附法将葡萄糖氧化酶固定在电极表面，然后再在电极表面生长金来加固葡萄糖氧化酶在电极表面的固定。本发明有效的解决了生物分子与固体表面结合力弱，易泄露或解脱，稳定性差等问题，而且纳米金具有良好的生物相容性且导电性好，对氧化还原反应具有较强的催化活性，加速酶的再生速度,提高葡萄糖氧化酶电极的响应灵敏度。该制备方法简单，重现性好，抗干扰能力强，具有很高的实用价值，特别是在电化学方面有很好的应用前景。

主权项

一种基于酶催化还原氯金酸的葡萄糖氧化酶电极制备方法，其特征在于具体步骤为：(1)用α‑氧化铝抛光粉打磨Pt电极至镜面，然后用二次水冲洗，接着用蒸馏水超声清洗3分钟，然后用1mmol/L的铁氰化钾溶液作底液，循环伏安法扫描电极，扫描电位范围为‑0.2~0.6 V，当△Ep=Ep₁‑Ep₂≤0.08 V，即制得备用Pt电极；(2)取5μL浓度为10~30 mg/mL葡萄糖氧化酶滴到步骤(1)制备的备用Pt电极表面，自然凉干，然后放进冰箱4~8小时，以使葡萄糖氧化酶黏合紧密，制得葡萄糖氧化酶修饰的电极；(3)取250μL pH值为6~7的 PBS溶液和50 μL 质量百分比浓度为1%的HAuCl₄ 水溶液，两者混匀，接着加50μL 十六烷基三甲基氯化铵和500 μL浓度为0.01 mol/L的葡萄糖，最后加H₂O定溶至5 ml，即配制得金生长溶液；(4)取5μL步骤(3)配制的金生长溶液滴到步骤(2)制得的葡萄糖氧化酶修饰的Pt电极上，凉干后再补滴5μL，重复上述操作5次，然后用二次水冲洗电极，凉干，即制得基于酶催化还原氯金酸的葡萄糖氧化酶电极；所述α‑氧化铝抛光粉的中位粒径为d50=30~50nm；所述PBS溶液为0.2 mol/L的NaH₂PO₄‑Na₂HPO₄缓冲溶液。