[发明专利]一种双膜连续结晶法分离提取发酵液中分支链氨基酸的方法

摘要

一种双膜连续结晶法分离提取发酵液中分支链氨基酸的方法，该方法首先通过双膜即微滤膜、纳滤膜分离系统错流过滤去除发酵液中的菌体、大部分蛋白和色素，然后通过溶胶脱蛋白、活性炭脱色、真空浓缩结晶、碱溶、脱蛋白脱色、低温等电连续结晶等操作步骤，得到纯度98.5％以上的分支链氨基酸结晶，收率达到80％以上。本发明采用微滤膜过滤菌体，改变了常规发酵液处理采用的离心、压滤机压滤等方法，菌体去除彻底，过滤液澄清透明；采用溶胶进一步去除发酵液中可溶性蛋白，采用低温等电连续结晶节省了蒸汽用量，提高产品品质。该技术去除了传统的离子交换工艺，避免产生大量高氨氮废水，实现了分支链氨基酸清洁生产。

主权项

一种双膜连续结晶法分离提取发酵液中分支链氨基酸的方法，其特征在于该方法首先通过双膜即微滤膜、纳滤膜分离系统错流过滤去除发酵液中的菌体、大部分蛋白和部分色素，然后通过氯化钙和磷酸二氢钠溶胶脱蛋白、粉末活性炭脱色、真空强制循环浓缩结晶、碱溶、脱蛋白脱色、低温等电连续结晶操作步骤，得到纯度98.5％以上的分支链氨基酸结晶，收率达到80％以上，具体步骤如下：a、将分支链氨基酸发酵液经活菌灭活，调节pH为7.0，加入质量浓度为0.01％‑0.2％的明矾和0.1％‑1.0％的硅藻土，进入微滤膜分离系统进行微滤，得到去除菌体的分支链氨基酸微滤液以及菌体蛋白；b、将经a步得到澄清的分支链氨基酸过滤液泵入纳滤膜过滤器，对过滤液进行除蛋白和脱色处理，操作温度为35℃，操作压力差为0.2MPa，得到分支链氨基酸过滤液；c、将b步获得的过滤液加入质量浓度为0.05％‑0.1％的氯化钙和0.04％‑0.8％的磷酸二氢钠，氯化钙和磷酸二氢钠的摩尔比为3:2，用25％的氨水调pH至7.0‑8.0，搅拌10‑20min，离心去除沉淀；d、将c步去除蛋白后的分支链氨基酸上清液加入0.05％‑0.5％的活性炭脱色，温度50‑60℃，搅拌脱色20‑30min，过滤获得脱色液；e、将d步获得的脱色液调pH为5.8‑6.0后进行减压蒸发，浓缩体积至原液的10％‑20％时停止蒸发，过滤后得到分支链氨基酸粗品和母液；母液喷雾干燥作为农用复合肥；f、将e步得到的分支链氨基酸粗品添加8倍重量的水，用30％NaOH溶液调解pH至9.5‑10.0，直至分支链氨基酸粗品完全溶解，搅拌半小时，出现絮状蛋白沉淀后，加入溶液重量0.5％的粉末活性炭，脱色20‑30min，过滤，获得上清液；g、将f步获得的分支链氨基酸上清液连续缓慢流加至低温等电结晶罐中，罐内结晶温度5～10℃，通过连续流加6mol/L的盐酸使罐内pH维持在6.0；h、将g步获得的分支链氨基酸结晶混悬液育晶8‑10h，过滤获得分支链氨基酸纯品，母液打入d步循环套用。