[发明专利]一种红花百里香无菌苗诱导再生植株的方法

摘要

本发明涉及诱导再生技术领域，尤其涉及一种红花百里香无菌苗诱导再生植株的方法。它包括无菌苗的获取、不定芽的诱导分化、不定芽的增殖培养、不定芽的生根培养以及幼苗移栽等步骤。不定芽的诱导分化期，选取培养30±2天的红花百里香无菌苗进行不定芽诱导培养，其诱导率最高可达94％，并且不定芽的生长状况良好。将红花百里香不定芽接种到增殖培养基中，其增殖系数最高达到39.90±1.72，不定芽的茎较粗、颜色泛绿。不定芽的生根培养及幼苗移栽，在第15天开始萌动生长出小根，30天平均生根数达到8.0，生根率为100％，将小苗移栽到已灭菌的培养基质中，浸透水后放入人工温室培养，成活率为90％。

主权项

1.一种红花百里香无菌苗诱导再生植株的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.无菌苗的获取: 取红花百里香种子包裹在纱布中，放入培育瓶，先用酒精浸泡消毒，再用无菌水冲洗后放入次氯酸钠溶液浸泡 3±1min，最后用无菌水再次冲洗，消毒后的种子接种到 1/2MS培养基得红花百里香无菌苗；S2. 不定芽的诱导分化：选取培养 30±2天的红花百里香无菌苗，将其切成3±0.5cm且带有腋芽的茎段，接种到 MS培养基中，进行不定芽诱导培养，28±2天后,茎段周围已经生成不定芽；其中MS培养基是MS+6‑BA0.1mg/L+NAA 0.3mg/L培养基，不定芽的诱导率为94%，并且不定芽的生长状况良好；S3. 不定芽的增殖培养:红花百里香不定芽生长到 2±0.2cm时，将不定芽切分为每丛 3‑4个芽，转接到调整的 MS培养基进行不定芽增殖培养；所述调整的 MS培养基，还加入细胞分裂激素 6－BA和植物生长素萘乙酸NAA，加入后细胞分裂激素6－BA浓度是0.1mg/L，植物生长素萘乙酸NAA浓度是0.3mg/L，进一步地，所述不定芽增殖培养的MS培养基中大量元素比例为1，微量元素比例为1/2；S4.不定芽的生根培养及幼苗移栽：在红花百里香不定芽长到 4cm以上时，将其切成 3±0.2 cm左右的茎段，接种到不定芽生根 MS培养基上，诱导生根，在第 15±1天开始萌动生长出小根，30±2天生根数达到 8±1，当根长到 3cm以上时进行移栽；所述不定芽生根MS培养基，还加入植物生长素萘乙酸NAA，具体是MS+NAA1.0 mg/L 的培养基。