[发明专利]修饰DNA与石墨烯相结合的方法

摘要

修饰DNA与石墨烯相结合的方法，将修饰DNA与石墨烯量子点通过沟槽结合的新方法，属于生物领域。其特征在于，利用GQDs的碳六圆环与DNA中碱基结构具有的相似性，将设计的双链DNA中缺失一个碱基，使GQDs插入双链DNA中，替代了缺失的碱基，从而产生DNA-abase-GQDs的复合结构。本发明产生的DNA-abase-GQDs复合结构与DNA-NH₂-GQDs复合结构及DNA-WM-GQDs复合结构相比，其具有良好的区分性，能够有效的用于研究DNA与石墨烯量子点或其他类似物质的相互作用。而且该生物纳米材料的合成方法也具有制作流程简单，制作成本低，便于研究及实际中的使用。

主权项

修饰DNA与石墨烯相结合的方法，其特征在于，步骤如下：1)、EDC溶液的配制：将乙基‑(3‑二甲基丙基)碳二亚胺盐酸盐粉末溶于二次水中，用二次水稀释得0.1mol/L EDC溶液；2)、NHS溶液的配制：将N‑羟基琥珀酰亚胺粉末溶于二次水中，用二次水稀释得0.1mol/L NHS溶液；3)、PBS的配制：取0.2328g十二水合磷酸氢二钠，0.0897g二水合磷酸二氢钠，0.58g氯化钠于250ml容量瓶中，用二次水稀释得5mMPBS缓冲溶液；4)、双链DNA溶液的配置：首先将6条不同序列的单链DNA粉末在离心机中于6000rpm下离心5min，其中ssDNA‑2在5’端由氨基修饰，再用5mM PBS分别稀释得到50mM ssDNA溶液，将互补的ssDNA溶液等体积混合并同氮气除氧，之后将混合好的溶液于90度下水浴加热5min，最后冷却至室温生成三种不同结构的双链DNA溶液，其中ssDNA‑1、ssDNA‑2、ssDNA‑3合成的dsDNA‑NH₂，ssDNA‑1、ssDNA‑4、ssDNA‑5合成dsDNA‑abase，ssDNA‑1、ssDNA‑6合成dsDNA‑WM，其中dsDNA‑NH₂为60bp的第26个碱基对上修饰了NH₂的双链DNA，dsDNA‑abase为60bp的第26个碱基对上缺失了一个碱基的双链DNA，dsDNA‑WM为60bp的完全互补的双链DNA；5)、石墨烯量子点ester溶液的配置：将100μl1mg/ml的粒径小于10nm的石墨烯量子点原液中加入10μl EDC和5μl NHS，并将混合溶液于室温下放置1h，使石墨烯量子点表面的羧基充分活化；6)、取10μl 1mg/ml的石墨烯量子点原液加到200μldsDNA‑abase溶液中，并于摇床在37度的条件下以300rpm的速度震荡2小时，此时形成dsDNA‑abase‑GQDs复合物。