[发明专利]一种高效识别蛋白精氨酸鼠李糖基化的多克隆抗体及其制备方法

摘要

本发明涉及一种高效识别蛋白精氨酸鼠李糖基化多克隆抗体的制备方法，该抗体主要用于包含精氨酸鼠李糖基化修饰的天然蛋白的检测以及新型抗生素的筛选与发现。过程：第一步，在银催化下的固相条件下直接进行糖基化得到包含精氨酸鼠李糖基化的多肽，其序列为：Ac‑CGR(Rha)GL‑OH。第二步，将得到的半抗原偶联到载体蛋白BSA上，得到抗原，并将其免疫动物，收集免疫新西兰兔血液制备抗血清，通过亲和纯化得到IgG。本发明的抗体生产成本低，特异性好，效价高，能特异性地识别精氨酸鼠李糖基化修饰的蛋白。该抗体可用于发现更多的包含精氨酸鼠李糖基化修饰的天然蛋白，以及包含抗体药物以及小分子药物两方面的新型抗生素的筛选。

主权项

1.一种含有精氨酸鼠李糖基化修饰的糖肽，其特征在于，所述糖肽结构如下所示：所述含有精氨酸鼠李糖基化修饰的糖肽的制备方法包括如下步骤：a)化合物2在乙酰氯中反应得到化合物3；b)化合物3在硫氰化钾与四丁基碘化铵的作用下回流得到化合物4；c)化合物4在氨气作用下氨化得到化合物5；d)化合物5在碘乙烷、二碳酸二叔丁酯、三乙胺的作用下分两步反应得到化合物6；e)以2‑氯三苯甲基树脂作为载体，Fmoc‑Orn(Alloc)‑OH作为糖基化的启动氨基酸，采用基于9‑芴甲氧羰基的固相肽合成方法制备化合物7；f)化合物7与化合物6在硝酸银催化下反应得到化合物8；g)化合物8在5％的水合肼作用脱去乙酰基，得到目标化合物1；