[发明专利]一种离心法结合阴离子交换层析介质制备藻红蛋白的方法在审
申请号: | 201510898933.1 | 申请日: | 2015-12-09 |
公开(公告)号: | CN106117326A | 公开(公告)日: | 2016-11-16 |
发明(设计)人: | 唐志红;吕家森;赵吉路;张超 | 申请(专利权)人: | 烟台大学 |
主分类号: | C07K14/405 | 分类号: | C07K14/405;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 264005 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了一种离心法结合阴离子交换层析介质制备藻红蛋白的方法。以新鲜紫球藻为原料,离心后将藻泥与磷酸盐缓冲液按一定比例混合后进行超声破碎处理,得到破壁液;将破壁液冷冻离心后取上清液,上清液用分子截留量为50~60kD的膜包超滤4~6次后,加入用磷酸盐缓冲液预处理的强阴离子层析介质,经两次冷冻离心后,取上清,得到纯度A545/A280>4.0的藻红蛋白。本发明所采取的制备方法,工艺简便,成本低,纯化效果好,蛋白回收率高,易于放大,具有较好的推广价值及应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 离心 结合 阴离子 交换 层析 介质 制备 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
一种离心法结合阴离子交换层析介质制备藻红蛋白的方法,其特征在于所述制备方法包括如下步骤:(1) 离心收集新鲜培养的紫球藻,将藻泥与磷酸盐缓冲液按1:5~1:10比例混合,得细胞悬液;(2) 将步骤(1)所得细胞悬液在0~4˚C条件下进行超声波处理,得到破壁液;将破壁液冷冻离心, 收集上清液;(3) 室温下将步骤(3)所得上清液超滤后得到藻红蛋白粗提液,然后向藻红蛋白粗提液中加入20%饱和度硫酸铵; (4) 向步骤(4)所得的藻蓝蛋白粗提液加入用磷酸盐缓冲液预处理的强阴离子层析介质,充分混匀,冷冻离心,取沉淀;接着向沉淀中加入2倍体积含有0.1mol/LNaCl的磷酸盐缓冲液,充分混匀,冷冻离心,取上清,得到纯化的藻红蛋白。
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