[发明专利]一种毒黄素的液相色谱‑串联质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种毒黄素的液相色谱‑串联质谱检测方法，包括下列步骤(1)样品前处理；(2)富集和净化；（3）LC‑MS/MS检测。本发明的方法操作简便、定性定量能力较强，可作为检测酵米面质量和评估食品安全风险的可靠方法。

主权项

一种毒黄素的液相色谱‑串联质谱检测方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)样品前处理准确称取经过粉碎、均质过的待检测样品1.0 g，用5 mL超纯水溶液提取毒黄素，200 rpm摇床震荡30 min，20 ℃以下8000 rpm离心10 min，取上清液，以2 mol/L甲酸调节上清液pH值至6~7；用5 mL超纯水重复提取一次，合并两次上清液，用超纯水定容至10mL；得到纯净的粗提液；(2)富集和净化富集净化使用固相萃取柱，固相萃取柱为弱阳离子交换柱，粒径33 μm，孔径85 Å，表面积800 m2/g，离子容量1.0 meq/g；具体步骤是：首先以1 mL甲醇和1 mL超纯水活化离子交换柱，活化过程流速控制在1‑2滴/秒，取2 mL粗提液注入离子交换柱进行净化富集，流速控制在1滴/秒，接着用1 mL超纯水淋洗离子交换柱，以去除杂质，最后以1.0 mL 甲醇溶液分两次洗脱毒黄素，氮气吹至近干，以50 %乙腈水溶液（v/v）定容至0.4 mL，待液相色谱‑串联质谱（LC‑MS/MS）检测；（3）LC‑MS/MS检测液相条件 Phenomenex Gemini C18反相色谱柱，3.0 mm×150 mm，5 μm；柱温30 ℃；进样量20 μL；流动相A为水，含有0.1%甲酸（v/v）和5 mmol/L甲酸铵；B为95 %乙腈，含有0.1%甲酸（v/v）和5 mmol/L甲酸铵；梯度洗脱；梯度洗脱条件如下：质谱条件 离子化方式为电喷雾离子化负模式（ESI‑）；多反应监测模式（MRM）；碰撞气压力（CAD）：6psi；气帘气压力（CUR）：10 psi；电喷雾电压（IS）：‑4500 V；离子源温度（TEM）：600 ℃；毒黄素的多反应监测离子对及质谱相关参数如下表：*为定量离子。