[发明专利]一种海蜇足囊石蜡切片前期处理方法

摘要

一种海蜇足囊石蜡切片前期处理方法，本发明属于腔肠动物组织切片制备技术领域，它的步骤包括取样处理、第一次固定、足囊穿刺、第二次固定、足囊收集、超声清洗、琼脂凝集及第三次固定。本发明在保证组织形态完整的前提下，使海蜇足囊彻底固定，该方法实用性强，操作简单，足囊固定效果好，更利于海蜇足囊的石蜡切片制作等后续研究的开展。

主权项

1.一种海蜇足囊石蜡切片前期处理方法，其特征在于，包括如下步骤：a、取样处理：将带有足囊的波纹板清洗后，剪成长、宽为1‑3cm的小片；b、第一次固定：带有足囊的波纹板小片经Bouin氏固定液固定30min‑60min；c、足囊穿刺：固定后的足囊用磷酸缓冲液清洗3‑5次，用细针从足囊侧面，斜向下将一侧几丁质外膜刺穿；d、第二次固定：将上述步骤处理的足囊由Bouin氏固定液固定1‑2h；e、足囊收集：将上述步骤处理的足囊用磷酸缓冲液清洗2‑3次后，用解剖针将波纹板上的足囊小心的铲下，收集；f、超声清洗：将上述步骤收集的足囊置于超声管中，清洗1‑3min，之后用磷酸缓冲液清洗3‑5次；g、琼脂凝集：将上述步骤清洗的足囊收集到1.5ml离心管中，弃去上清，加入50‑150μl冷却至35‑40℃的1.5％低熔点琼脂，混匀静置5‑10min，冷凝后去除多余琼脂；h、第三次固定：将包含有足囊的琼脂块转入Bouin氏固定液中固定10‑20h，后续操作与常规石蜡切片相同。