[发明专利]一种小鼠肾足细胞分离及培养方法在审
| 申请号： | 201510906695.4 | 申请日： | 2015-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN106834205A | 公开（公告）日： | 2017-06-13 |
| 发明（设计）人： | 张清;张亚洲;蒋敏;齐来俊 | 申请（专利权）人： | 江苏齐氏生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214400 江苏省江阴市东盛*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种鼠肾足细胞分离及培养方法，包括步骤(a)腹腔注射2％戊巴比妥钠处死小鼠，酒精消毒后取出小鼠肾脏组织，置于预冷无菌含双抗的PBS缓冲液中浸泡洗涤，并剥离除去肾包膜；(b)机械解离肾脏组织后，预热混合酶液消化，混合完全培养液终止消化；(c)采用差异过筛的方法获得肾足细胞，将足细胞接种于处理后的细胞瓶中培养；(d)将培养3d的细胞经胰酶消化后再次筛网过滤，离心弃上清，重悬接种于处理后的细胞瓶中；(e)细胞免疫荧光鉴定肾足突细胞。本发明提供的小鼠肾足细胞分离及培养方法重复性好，操作简便，而且可获得产量高、纯度高的小鼠肾足细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小鼠 细胞 分离 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种小鼠肾足细胞细胞分离及培养方法，其特征在于，包括步骤：(a)腹腔注射2％戊巴比妥钠处死小鼠，酒精消毒后取出小鼠肾脏组织，置于预冷无菌含双抗的PBS缓冲液中浸泡洗涤，并剥离除去肾包膜；(b)机械解离肾脏组织后，预热混合酶液消化，混合完全培养液终止消化；(c)采用差异过筛的方法获得肾足细胞，将足细胞接种于处理后的细胞瓶中培养；(d)将培养3d的细胞经胰酶消化后再次筛网纯化，离心弃上清，重悬接种于处理后的细胞瓶中；(e)细胞免疫荧光鉴定肾足突细胞。
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