[发明专利]一株异源表达MpFADS6基因的重组高山被孢霉菌株、其构建方法及其在生产EPA中的应用有效
| 申请号： | 201510908895.3 | 申请日： | 2015-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN105296368B | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 陈海琴;陈永泉;史海粟;顾震南;张灏;陈卫 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12P7/64;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙) 11305 | 代理人： | 刘秀娟 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明通过来自细小微胞藻中的delta‑6脱饱和酶基因MpFADS6，提供了异源表达MpFADS6基因的重组高山被孢霉菌株M.alpina‑MpFADS6，本发明还提供了所述重组高山被孢霉菌株在生产EPA的用途，并通过添加1％牡丹籽油或50g/L牡丹籽粕汁的培养基中有效提高EPA产量，对产油真菌高山被孢霉的脂肪酸合成中的代谢调控基础理论研究及PUFAs的生产具有重要的意义。本发明与在高山被孢霉中过表达ω3脂肪酸脱饱和酶基因相比，EPA产量提升5倍，产量可达588.5±29.6mg/L。 | ||
| 搜索关键词： | 一株异源 表达 mpfads6 基因 重组 高山 霉菌 构建 方法 及其 生产 epa 中的 应用 | ||
【主权项】：
1.异源表达MpFADS6基因的重组高山被孢霉在生产EPA中的应用，包括：1)摇瓶种子培养：取500μL浓度为107个/mL的重组高山被孢霉菌株的孢子液，接种于含种子培养基50mL的250mL锥形瓶中，28℃200r/min摇床培养36h，将湿菌体称重，加入4倍重量的种子培养基用分散器打散，作为发酵用菌种；所述异源表达MpFADS6基因的重组高山被孢霉是高山被孢霉(Mortierella alpina)MpFADS6，该菌株于2015年07月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.11002；所述种子培养基组成为：20g/L葡萄糖，5g/L酵母提取物，1g/L KH2PO4，0.25g/L MgSO4·7H2O，10g/L KNO3，pH 6.8；发酵培养基成分：葡萄糖50g/L，1vol‰牡丹籽油(PSO)和0.5vol％Tween 80或50g/L牡丹籽粕汁(PSM)，KNO313.3g/L，KH2PO43g/L，Na2SO41g/L，MgCl2·6H2O 0.5g/L，CaCl2·2H2O 0.5g/L，pH 6.0，115℃灭菌20min；所述牡丹籽粕汁由以下方法得到：取200g牡丹籽粕，粉碎过筛后置于4L水中煮沸，沉淀，用4层纱布过滤，得到牡丹籽粕；2)摇瓶发酵培养：发酵用菌种按1wt％的接种量接种到含发酵培养基50mL的250mL锥形瓶中，28℃200rpm/min摇床培养7天，或28℃200rpm/min培养3天再12℃培养8天；3)收集菌体并提取脂肪酸。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学，未经江南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201510908895.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
