[发明专利]水产品常见病毒检测试剂盒

摘要

本发明涉及水产品检测用品领域内的一种水产品常见病毒检测试剂盒，主要由引物组合和膜芯片组成，引物组合为7重聚合酶链式反应引物组合，其中，反向引物的5’端接上Tag序列，引物组合中还含有一条5’端带生物素标志的Tag引物，膜芯片为顺序固定在支持膜表面的7组探针序列、1组阳性对照探针序列和1组阴性对照探针序列。本发明克服了现有水产品病毒检测技术费时费力成本高的缺陷，提供的水产品常见病毒检测试剂盒操作简单，快速灵敏，检测通量大，检测结果可视化，成本低廉。

主权项

1.一种水产品常见病毒检测试剂盒，包括引物组合、膜芯片和辅料，其特征在于引物组合为7重聚合酶链式反应引物组合，各对引物的碱基序列5’‑3’如下：外参基因:正向引物:GATTTGGACCTGCGAGC反向引物:GGTTGGCCAGGCGCGAAG；甲肝病毒:正向引物:ACAACTGTAAATGGAACCCC反向引物:AGCAACATGGATGCCCAA；星状病毒:正向引物:GAATTTCCTCTCCGCCTGAC反向引物:CGGTTGTTCTCATCAGAGTCC；诺瓦克病毒:正向引物:ACCTAACCACCAGAACCCCTT反向引物:CTCAGCATCCATTGTTCCAAAGCG；轮状病毒:正向引物:CTTTTCCATCCGAAATTAACAC反向引物:AATATAAGGCAACCACGGTA；脊灰病毒:正向引物:AGGAGAAAATTATCCCACAAGC反向引物:AAACATACTGGTTCAATACGGTG；柯萨奇病毒:正向引物:AAAACGTGGCAGCTAATGGA反向引物:GCCACTCACCATAAGCAACA；其中，反向引物的5’端接上Tag序列，该Tag序列为5’‑AGTCCATGTCCCGAAACGTATACCGCAGTATGGCT‑3’；引物组合中还含有一条5’端带生物素标志的Tag引物，其碱基顺序如下所示：Tag引物：biotin‑5’‑AGTCCATGTCCCGAAACGTATACCGCAGTATGGCT‑3’；膜芯片为顺序固定在支持膜表面的7组探针序列、1组阳性对照探针序列和1组阴性对照探针序列，7组探针序列、阳性对照探针序列和阴性对照探针序列的碱基序列5’‑3’如下：外参基因探针:CTGACCTGAAGGCTCT；甲肝病毒探针:TCCAGGAAGACCTTCGCCTT；星状病毒探针:CTGTCCGCTTCATCGTCTTCGT；诺瓦克病毒探针:CCCAACTAATGGCCCTGCTCGGT；轮状病毒探针:CAAATTTACTTCCACCGTACACA；脊灰病毒探针:TTCCTGACTAGGGCATGATTGGT；柯萨奇病毒探针:ACGGTCACTGTAACCACATGCTTC；Positive探针:GCATCCAGATCAGAAGCAATAATGAGCAGTGCGAGAAGAACGAGTGTCCAAAGTACCAG；Negative探针:GGTTCCTTGAGAAATGTTTTACGGGATTACTTCCATGTTTGTTGGATGATCCTATTTTC；辅料为dNTPs、EX‑Taq聚合酶及5’端带生物素标志的阳性寡核苷酸单链DNA，该单链的碱基序列为：biotin‑5'‑CTGGTACTTTGGACACTCGTTCTTCTCGCACTGCTCATTATTGCTTCTGATCTGGATGC‑3’。