[发明专利]一种用于分步培养hUC-MSC的试剂盒及采用所述试剂盒获得的hUC-MSC有效

专利信息
申请号: 201510919391.1 申请日: 2015-12-11
公开(公告)号: CN105420187B 公开(公告)日: 2019-06-21
发明(设计)人: 郭镭 申请(专利权)人: 郭镭;里程;圣释(北京)生物工程有限公司
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775
代理公司: 北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11382 代理人: 曹津燕;张伟
地址: 100018 北京市朝阳区*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC‑MSC)无血清培养方案。该方案采用分步法培养hUC‑MSC:先使用TME培养基培养3‑4小时促进hUC‑MSC贴壁,然后更换为TMD培养基进行快速扩增。TME和TMD无血清分步培养法很好地解决了hUC‑MSC无血清培养方法中细胞贴壁能力差、增殖缓慢、易分化等问题,为hUC‑MSC进行长期稳定的无血清培养技术奠定基础。
搜索关键词: 一种 用于 分步 培养 huc msc 试剂盒 采用 获得
【主权项】:
1.一种用于无血清分步培养hUC‑MSC的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括分开放置的TME培养基和TMD培养基,其中所述TME培养基由0.1体积份的β‑巯基乙醇、1体积份的非必需氨基酸水溶液和99体积份的a‑MEM组成,其中,所述非必需氨基酸水溶液包含浓度各为8‑12mM的甘氨酸、丙氨酸、L‑天门酰胺、L‑天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸和丝氨酸;所述TMD培养基由0.1体积份的β‑巯基乙醇、1体积份的非必需氨基酸水溶液、10体积份的血清替代物、89体积份的a‑MEM/DMEM‑F12和终浓度为10ng/ml的重组人碱性成纤维生长因子组成,其中,所述非必需氨基酸水溶液包含浓度各为8‑12mM的甘氨酸、丙氨酸、L‑天门酰胺、L‑天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸和丝氨酸。
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