[发明专利]一种畜禽饲料专用低温淀粉酶的制备方法

摘要

本发明提供了一种畜禽饲料专用低温淀粉酶的制备方法，包括如下步骤：1)一级斜面培养2)二级培养3)三级扩大培养4)固体发酵或1’)一级斜面培养2’)二级斜面培养3’)固体发酵。本发明的一种畜禽饲料专用低温淀粉酶的制备方法采用固体发酵工艺研制和生产，其最适作用温度条件较低，在动物体温(38-42℃)的条件下具有很强的活性，发挥最佳活性的pH值(4-6)范围和畜禽胃肠道pH值相吻合，具有优越的过胃性能，能抵抗胃酸和胃蛋白酶的破坏，耐热性能良好，能抵抗饲料制粒过程中的高温，储存稳定性好，是一种高效内切型淀粉酶，且是一种无毒副作用、无污染、无残留、安全高效的绿色饲料添加剂。

主权项

一种畜禽饲料专用低温淀粉酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)一级斜面培养：将低温淀粉酶产酶菌种接种至斜面培养基上，25℃～35℃培养4～8d，得到一级斜面种子孢子；2)二级培养：将步骤1)中的一级斜面种子孢子接种于液体培养基中，装液量为50～100mL/500mL，25℃～35℃、160～300rpm/min条件下培养48～55h得到二级种子液；3)三级扩大培养：将步骤2)中得到的二级种子液体积百分比0.5％～10％接种于发酵罐内，在液体培养基中25℃～45℃、160～300rpm/min条件下培养20～36h，得到三级种子液；4)固体发酵：将步骤3)的三级种子液的液体培养基按1％～10％的重量比接入固体发酵培养基中，培养基含水量为49％～65％，pH为5.0～7.0，曲房相对湿度保持在95％以上，料温为30℃～45℃，采用固体发酵48～72h；或者1’)一级斜面培养：将低温淀粉酶产酶菌种接种至斜面培养基上，25℃～35℃培养4～8d，得到一级斜面种子孢子；2’)二级斜面培养：将步骤1’)中的一级斜面种子孢子接种于内含斜面培养基的二级茄形培养瓶斜面，25℃～35℃培养4～8d得到二级斜面孢子；3’)固体发酵：将步骤2’)的二级斜面孢子制备为孢子悬液，按1个茄形培养瓶孢子悬液接种于100kg固体发酵培养基中，培养基含水量为50％～65％，pH为5.0～7.0，曲房相对湿度保持在95％以上，料温为30℃～45℃，采用固体发酵48～72h。