[发明专利]一种白及种子开放式组培繁殖方法

摘要

本发明公开了一种白及种子开放式组培繁殖法，它包括以下步骤：①容器准备，②白及种子处理，③种子萌发与取出，④开放式组培等；本发明解决了白及人工栽培中的关键技术问题，可以快速繁殖不受季节限制，在短期内获得大量种苗；不需要诱导形成愈伤组织，再生芽和根，继代多次增值，直接由种子培养成完整的幼苗，这样能减少接种次数和培养时间；开放式组培不需要经过高压灭菌，简化了组织培养操作环节，提高了工作效率，降低了植物组织培养育苗成本。在本发明中针对白及种子繁殖的特点，全面设计种子的繁殖过程，包括种子处理，培养基的配置，培养环境的设定等各方面，从而保证了白及种子快速繁殖。

主权项

一种白及种子开放式组培繁殖方法，其特征在于，它包括以下步骤：①容器准备取干净的透明带盖或塑料膜的培养容器，将消毒洁净不易长霉的保水材料铺在上述容器中，用培养基或叶面肥将材料润透；②白及种子处理取贮藏或新鲜的优质白及成熟果实，脱果皮，将净种子均匀洒播在上述洁净的材料上，种子表面喷洒培养基或叶面肥；③种子萌发与取出将上述种子放置在阴凉、通风处培养，每隔1～2天喷水1次，吸去多余的水份，待白及种子膨大、变绿后，用水冲洗种子，沥干，收集种子；④开放式组培⑴种子消毒将上述膨大、变绿的种子，用乙醇浸泡，然后用无菌蒸馏水冲洗干净，再用次氯酸钠消毒，然后用无菌蒸馏水冲洗干净；⑵培养基的配制幼苗形成培养基的配方：½MS+6‑BA0.2～1.0mg/L+NAA0.1～0.5mg/L+蔗糖26g/L +琼脂6～7g/L+复合抑菌剂；pH=5.8；生根壮苗培养基的配方：MS+6‑BA0.2～1.0mg/L+NAA0.1～0.5mg/L+蔗糖26g/L +琼脂6～7g /L+复合抑菌剂；pH=5.8；⑶接种及培养接种：将消好毒的组培瓶中装入幼苗形成培养基，将种子用含抑菌剂的无糖培养基稀释，用无菌滴管加入到已凝固的培养基上，种子撒播量为50～100粒；培养：在培养室中培养，培养温度为日温23±2℃，夜温18±2℃，相对湿度75～80%，模拟光照，经过10～15天，获得大量带叶的小苗，有细根或绒毛状细根长出，再经过15～30天，萌发培养完成，得白及1～2cm高幼苗；⑷生根壮苗培养在培养室中培养，在组培瓶中装入生根壮苗培养基，将白及幼苗消毒后，转接至瓶中，按照每瓶20～30株转接；培养温度为23±2℃，模拟光照，相对湿度75～80%；经过60～90天，白及苗高度在5cm以上，有3～5片叶子，完成壮苗培养；⑸出瓶驯化打开组培瓶，在大棚内适应性生长1～3天，再取出种苗，洗净培养基，消毒，晾干表面水分，在营养土中栽培，行距5cm、株距3cm，湿度70～80%，温度为10～30℃，遮阳率为60～70%，保持20～30天；然后，控制大棚内相对湿度60～70%，保持10～15天；完成驯化过程，再移栽至大田或林下坡地。