[发明专利]一种基于稻壳固定化玉米赤霉烯酮降解酶的霉菌毒素脱毒剂的制备方法及其应用有效
申请号: | 201510943066.9 | 申请日: | 2015-12-16 |
公开(公告)号: | CN105349521B | 公开(公告)日: | 2018-11-06 |
发明(设计)人: | 孙秀兰;何梦玲;皮付伟;张银志;何兴兴 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N11/02 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 耿晓岳 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于稻壳固定化玉米赤霉烯酮降解酶的霉菌毒素脱毒剂的制备方法及其应用,属于固定化酶技术领域。本发明采用稻壳上的羟基很容易被高碘酸钠氧化成醛基,而使其可以很好的与酶连接,稻壳载体即经济实惠,而且还具有高比表面积、表面存在孔隙、良好的生物相容性,未固定化酶提供了生物友好的微环境,有效的固定化酶的催化活性和稳定性。跟现有技术相比,本发明提供的方法工艺简单、成本少,而且具有稳定、高效脱除玉米赤霉烯酮真菌毒素等性质。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 稻壳 固定 玉米 赤霉烯酮 降解 霉菌 毒素 脱毒 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种固定化酶的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)先将稻壳依次加入到碱溶液、酸溶液中进行前处理,所述碱溶液为0.5mol/L的NaOH,室温搅拌反应24h;所述酸溶液为0.1mol/L的HCl溶液,室温搅拌反应12h;(2)将前处理后的稻壳加入到NaIO4溶液中,避光搅拌反应,反应完毕之后除去未反应的NaIO4、清洗、风干,得到氧化型稻壳,然后将氧化型稻壳加入尿素溶液中搅拌反应,再加入一定浓度的戊二醛搅拌反应,完毕之后用去离子水清洗,得到活化稻壳;(3)将活化稻壳与游离酶液混合,冰浴搅拌,离心收集沉淀,并用缓冲液洗涤,冷冻干燥后,即可得固定化酶;所述酶为玉米赤霉烯酮降解酶;所述步骤(2)是在2g/L的NaIO4溶液中室温反应3h,然后用0.5mol/L丙酮搅拌反应0.5h以去除未反应的NaIO4;所述步骤(2)的尿素溶液浓度为4mol/L,室温反应18h;所述戊二醛浓度为0.5mol/L,室温反应2h。
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