[发明专利]一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法

摘要

本发明涉及生物农药与微生物肥料领域，具体公开的是一种含有芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌的可湿性粉剂及其制备方法，该可湿性粉剂的原料由下列重量组份组成：枯草芽孢杆菌发酵液40‑70份，填料：硅藻土20‑30份；润湿剂：Morwet EFW 1‑4份；分散剂：CMC‑Na 0.2‑1份；芽孢萌发剂：L‑丙氨酸0.1‑0.5份，肌苷0.1‑0.5份，果糖0.5‑1.5份；紫外保护剂：抗坏血酸0.5‑2份，卵磷脂0.2‑1份；干燥保护剂：麦芽糖1‑4份，甲基纤维素0.2‑1份；增效剂：氨基寡糖素1‑2份；本发明制备的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂施入大田后芽孢萌发速度快，萌发率高，可明显提高其肥效与对植物病害防治效果，减少芽孢的用量，降低成本。

主权项

1.一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌可湿性粉剂由下列重量份组成：枯草芽孢杆菌发酵液40-70份，填料：硅藻土20-30份；润湿剂：Morwet EFW 1-4份；分散剂：CMC-Na 0.2-1份；芽孢萌发剂：L-丙氨酸0.1-0.5份，肌苷0.1-0.5份，果糖0.5-1.5份；紫外保护剂：抗坏血酸0.5-2份，卵磷脂0.2-1份；干燥保护剂：麦芽糖1-4份，甲基纤维素0.2-1份；增效剂：氨基寡糖素1-2份；所述枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法由以下几步骤组成：一、枯草芽孢杆菌发酵液的制备取出菌种保藏管，用NA固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时，在平板下挑取单个菌落接种至茄子瓶中NA固体培养基上，涂满整个茄子瓶，在培养箱中30℃培养48小时，将1L无菌水将茄子瓶中的菌苔洗下，将洗下的枯草芽孢杆菌接种于装有120L枯草芽孢杆菌液体培养基的200L种子发酵罐，初始pH值为7.2，温度为30℃，通风1:0.8，开搅拌，转速为200r/min；从菌种接种后18h时，菌体生长处于指数生长期，转入2000L的发酵罐的发酵培养基中，以70%的罐装量，pH值为7.2，温度为30℃，开搅拌，转速为160r/min，通气量为前16小时为每分钟液气比为1：1，其后通气量为1：1.2；培养32-42小时，检测其芽孢含量超过100亿CFU/ml，即可结束发酵，作为枯草芽孢杆菌发酵液；其中，所述NA培养基：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.2，固体培养基中加入琼脂2%；其中，所述枯草芽孢杆菌液体培养基：玉米粉20g/L，豆粕粉30g/L，鱼粉2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.5g/L，磷酸二氢钾2g/L，磷酸氢二钾1g/L，碳酸钙2g/L，pH7.2；其中，所述的发酵培养基：玉米粉32 g/L，豆粕粉68 g/L，鱼粉5g/L，硫酸镁0.5 g/L，硫酸锰0.6g/L，磷酸二氢钾3 g/L，磷酸氢二钾1.5 g/L，碳酸钙5 g/L，pH7.2；各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；二、将枯草芽孢杆菌发酵液40-70份；填料：硅藻土20-30份；紫外保护剂：抗坏血酸0.5-2份，卵磷脂0.2-1份；干燥保护剂：麦芽糖1-4份，甲基纤维素0.2-1份；混匀后喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌粉剂；三、将润湿剂：Morwet EFW 1-4份；分散剂：CMC-Na 0.2-1份；芽孢萌发剂：L-丙氨酸0.1-0.5份，肌苷0.1-0.5份，果糖0.5-1.5份；增效剂：氨基寡糖素1-2份；混匀得到枯草芽孢杆菌的助剂；四、将步骤二与步骤三所得到的枯草芽孢杆菌粉剂与助剂混匀并过通过气流粉碎机粉碎过400目筛，检测其芽孢含量不低于100亿cfu/g，悬浮率不低于85%，润湿时间不高于75s，水分含量低于5%，真空包装，即为枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。