[发明专利]一种对生肌膏中原料药进行鉴别的方法

摘要

本发明提供一种对生肌膏中原料药进行鉴别的方法，采用薄层色谱法对组成生肌膏中5味原料药象皮、麻油、当归、生地、血余一一进行薄层色谱鉴别，以研究在采用麻油对组成生肌膏中的当归、生地、血余进行高温炸制后，上述三种药材成分是否发生了变化，通过薄层色谱鉴别发现血余、生地经麻油高温炸制后，成分发生了变化，而当归中所含的阿魏酸在经过麻油高温炸制后已不存在于生肌膏中，通过该方法进一步确定了生肌膏内所含的物质，对于生肌膏的后续研究具有很大的意义。

主权项

一种对生肌膏中原料药进行鉴别的方法，其特征在于：生肌膏包含下列重量组份的原料药：象皮15‑20份，当归10‑15份，血余10‑15份，生地20‑30份，龟甲20‑30份，麻油400‑500份，炉甘石28‑32份，生石膏25‑30份以及蜂蜡80‑100份，按照下述方法进行测定：1.象皮的测定：步骤1，象皮供试品溶液的制备：取生肌膏水浴加热使其熔化，向容器内加入热水，充分搅拌，置于冰箱放置，待上层凝固后，取下层混悬液，过滤，残渣加甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后得到象皮供试品溶液；步骤2，象皮对照药材溶液的制备：取象皮对照药材用滑石粉烫至发泡后粉碎成细粉，即得象皮粉，向象皮粉内加入甲醇，超声处理，过滤，取滤液，将滤液蒸干后得到残渣，向残渣内加入甲醇使残渣溶解，即得象皮对照药材溶液；步骤3，不含象皮阴性样品溶液的制备：按照当归10‑15份，血余10‑15份，生地20‑30份，龟甲20‑30份，麻油400‑500份，炉甘石28‑32份，生石膏25‑30份以及蜂蜡80‑100份，将炉甘石、石膏粉碎成细粉，过筛备用，当归、龟甲、血余、生地与麻油同置锅内炸枯，去渣，过滤，将蜂蜡完全熔化后滤入热油内，离火降温，加入炉甘石粉以及石膏粉，不断搅拌至冷却成膏，即得不含象皮阴性样品，取不含象皮阴性样品水浴加热使其熔化，向容器内加入热水，充分搅拌，置于冰箱放置，待上层凝固后，取下层混悬液，过滤，残渣加甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后得到不含象皮阴性样品溶液；步骤4，测定过程：第一向展开，取象皮供试品溶液点于硅胶G薄层板x轴原点处，以环己烷‑丙酮‑乙酸乙酯为展开剂，其中环己烷：丙酮：乙酸乙酯的配比为(4‑6)∶(1‑3)∶(0.5‑2)，沿x轴展开后，取出晾干，第二向展开，取象皮对照药材溶液，点于x轴距原点约6‑8cm处，以环己烷‑甲苯‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，其中环己烷：甲苯：乙酸乙酯：甲酸的配比为(4‑6)∶(4‑6)∶(0.1‑1)∶(0.05‑0.2)，沿y轴方向展开后，取出晾干，置于紫外光灯365nm下观察；2.血余的测定：步骤1，血余供试品溶液的制备：取生肌膏水浴加热使其熔化，向容器中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩，即得血余供试品溶液；步骤2，血余对照药材溶液的制备：取血余对照药材，用250℃麻油炸制一段时间后去渣，过滤，取滤液，向滤液中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩，即得血余对照药材溶液；步骤3，不含血余阴性样品溶液的制备：按照象皮15‑20份，当归10‑15份，生地20‑30份，龟甲20‑30份，麻油400‑500份，炉甘石28‑32份，生石膏25‑30份以及蜂蜡80‑100份，将炉甘石、石膏粉碎成细粉，象皮用滑石粉烫至发泡后粉碎成细粉，即得象皮粉，过筛备用，当归、龟甲、生地与麻油同置锅内炸枯，去渣，过滤，将蜂蜡完全熔化后滤入热油内，离火降温，加入炉甘石粉、石膏粉及象皮粉，不断搅拌至冷却成膏，即得不含血余阴性样品，取不含血余阴性样品水浴加热使其熔化，向容器中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后，得到不含血余阴性样品溶液；步骤4，测定过程：取血余供试品溶液、不含血余阴性样品溶液和血余对照药材溶液，分别点于同一硅胶G的薄层板上，以石油醚(60‑90℃)‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，其中石油醚(60‑90℃)：乙酸乙酯：甲酸的配比为(13‑15)∶(3‑5)∶(0.1‑0.8)，展开10‑12cm后，取出晾干，再用上述展开剂分别展开两次后，取出晾干，置于紫外光灯365nm下观察；3.生地的测定：步骤1，生地供试品溶液的制备：取生肌膏水浴加热使其熔化，向容器中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩得到生地供试品溶液；步骤2，生地对照药材溶液的制备：取生地对照药材，用200℃麻油炸透，过滤，取滤液，向滤液中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后，即得生地对照药材溶液；步骤3，不含生地阴性样品溶液的制备：按照象皮15‑20份，当归10‑15份，血余10‑15份，龟甲20‑30份，麻油400‑500份，炉甘石28‑32份，生石膏25‑30份以及蜂蜡80‑100份，将炉甘石、石膏粉碎成细粉，象皮用滑石粉烫至发泡后粉碎成细粉，即得象皮粉，过筛备用，当归、龟甲、血余与麻油同置锅内炸枯，去渣，滤过，将蜂蜡完全熔化后滤入热油内，离火降温，加入炉甘石粉、石膏粉及象皮粉，不断搅拌至冷却成膏，即得不含生地阴性样品，取不含生地阴性样品水浴加热使其熔化，向容器中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩得到不含生地阴性样品溶液；步骤4，测定过程：取生地供试品溶液、不含生地阴性样品溶液和生地对照药材溶液，分别点于同一硅胶G的薄层板上，第一次展开以环己烷‑甲苯‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，其中环己烷：甲苯：乙酸乙酯：甲酸的配比为(4‑6)∶(2‑4)∶(1‑3)∶(0.05‑0.2)，展开15‑17cm后，取出晾干，第二次展开以石油醚(60‑90℃)‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，其中石油醚(60‑90℃)：乙酸乙酯：甲酸的配比为(13‑15)∶(3‑5)∶(0.1‑0.8)，展开13‑15cm后，取出晾干，第三次展开以环己烷‑甲苯‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，其中环己烷：甲苯：乙酸乙酯：甲酸的配比为(4‑6)∶(4‑6)∶(0.1‑1)∶(0.01‑0.2)，展开13‑15cm后，取出晾干，置于紫外光灯365nm下观察；4.当归的测定：步骤1，当归供试品溶液的制备：取生肌膏，向其中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后，即得当归供试品溶液；步骤2，当归对照药材溶液的制备：取对照药材当归，向当归中加入甲醇，超声处理，过滤，取滤液即得当归对照药材溶液；步骤3，不含当归阴性样品溶液的制备：按照象皮15‑20份，血余10‑15份，生地20‑30份，龟甲20‑30份，麻油400‑500份，炉甘石28‑32份，生石膏25‑30份以及蜂蜡80‑100份，将炉甘石、石膏、象皮粉碎成极细粉，过筛备用，龟甲、血余、生地与麻油同置锅内炸枯，去渣，滤过，将蜂蜡完全熔化后滤入热油内离火降温，加入炉甘石粉、石膏粉及象皮粉，不断搅拌至冷却成膏，即得不含当归阴性样品，取不含当归阴性样品，向其中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后，即得不含当归阴性样品溶液；步骤4，测定过程：取上述当归供试品溶液、不含当归阴性样品溶液和当归对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷‑甲苯‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，其中环己烷：甲苯：乙酸乙酯：甲酸的配比为5∶5∶0.5∶0.1，进行展开，展开后取出晾干，置于紫外光灯365nm下观察；5.麻油的测定：步骤1，麻油供试品溶液的制备：取生肌膏，向其中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后，即得麻油供试品溶液；步骤2，芝麻素对照品溶液的制备：取芝麻素对照品，向芝麻素对照品中加入甲醇，制成每1ml含1mg的溶液,即为芝麻素对照品溶液；步骤3，不含麻油阴性样品溶液的制备：按照象皮15‑20份，当归10‑15份，血余10‑15份，生地20‑30份，龟甲20‑30份，炉甘石28‑32份，生石膏25‑30份以及蜂蜡80‑100份，将炉甘石、石膏粉碎成细粉，象皮用滑石粉烫至发泡后粉碎成细粉，即得象皮粉，过筛备用，将上述原料混合，即得不含麻油阴性样品，取不含麻油阴性样品，向其中加入甲醇，超声处理，过滤，滤液浓缩后，即得不含麻油阴性样品溶液；步骤4，测定过程：取上述麻油供试品溶液、不含麻油阴性样品溶液和芝麻素对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷‑乙醚‑乙酸乙酯为展开剂，其中环己烷：乙醚：乙酸乙酯的配比为(18‑22)∶(5.0‑6.0)∶(2.0‑3.0)，展开后取出晾干，向晾干后的硅胶G薄层板喷上10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；6.阿魏酸的测定：步骤1，阿魏酸供试品溶液的制备：取生肌膏，水浴加热使其熔化，向其中加入1％碳酸氢钠溶液，超声处理，过滤，所得滤液用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取，合并提取液，将乙醚挥发，所得残渣加入甲醇使其溶解，即得阿魏酸供试品溶液；步骤2，阿魏酸对照品溶液的制备：取阿魏酸对照品，向阿魏酸对照品中加入甲醇制成每1ml含1mg的溶液，即得阿魏酸对照品溶液；步骤3，不含阿魏酸阴性样品溶液的制备：按照象皮15‑20份，血余10‑15份，生地20‑30份，龟甲20‑30份，麻油400‑500份，炉甘石28‑32份，生石膏25‑30份以及蜂蜡80‑100份，将炉甘石、石膏粉碎成细粉，象皮用滑石粉烫至发泡后粉碎成细粉，即得象皮粉，过筛备用，龟甲、血余、生地与麻油同置锅内炸枯，去渣，滤过，将蜂蜡完全熔化后滤入热油内离火降温，加入炉甘石粉、石膏粉及象皮粉，不断搅拌至冷却成膏，即得不含阿魏酸阴性样品，取不含阿魏酸阴性样品，水浴加热使其熔化，向其中加入1％碳酸氢钠溶液，超声处理，过滤，所得滤液用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取，合并提取液，将乙醚挥发，所得残渣加入甲醇使其溶解，即得不含阿魏酸阴性样品溶液；步骤4，测定过程：取上述阿魏酸供试品溶液、阿魏酸对照品溶液及不含阿魏酸阴性样品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷‑二氯甲烷‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，其中环己烷：二氯甲烷：乙酸乙酯：甲酸的配比为(3‑5)∶(0.5‑2)∶(0.5‑2)∶(0.05‑0.2)，进行展开，展开后取出晾干，再用上述展开剂二次展开，展开后取出晾干，置于紫外光灯365nm下观察。