[发明专利]慢病毒表达载体及其制备方法和应用、重组慢病毒的制备方法在审
| 申请号： | 201510963004.4 | 申请日： | 2015-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN105483158A | 公开（公告）日： | 2016-04-13 |
| 发明（设计）人： | 杨世成;毛侃琅 | 申请（专利权）人： | 深圳精准医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66;C12N7/01 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 生启 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区科园*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种及其制备方法和应用、重组慢病毒的制备方法，所述慢病毒表达载体为pRRLSIN.cPPT.MSCV-Dual.WPRE载体，pRRLSIN.cPPT.MSCV-Dual.WPRE载体为pRRLSIN.cPPT.MSCV/GFP.WPRE载体的GFP序列被替换为双基因表达盒子Dual得到；双基因表达盒子Dual包括从5’到3’端依次排列的如下结构：第一多克隆位点-弗林蛋白酶切割位点-V5标签-Spacer-2A肽-第二多克隆位点，其中，“-”代表连接。这种慢病毒表达载体利用2A肽实现双外源基因在哺乳动物细胞内的表达，2A肽具有“自我剪切”的特性，在蛋白质的翻译过程中，2A肽改变了核糖体的活性，促进2A肽残基Gly与tRNAGly之间酯链的水解，从转录复合物上释放上游多肽的同时又起始下游多肽的翻译，在翻译水平上实现的双基因表达。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒 表达 载体 及其 制备 方法 应用 重组 | ||
【主权项】：
一种慢病毒表达载体，其特征在于，所述慢病毒表达载体为pRRLSIN.cPPT.MSCV‑Dual.WPRE载体，所述pRRLSIN.cPPT.MSCV‑Dual.WPRE载体为pRRLSIN.cPPT.MSCV/GFP.WPRE载体的GFP序列被替换为双基因表达盒子Dual得到；所述双基因表达盒子Dual包括从5’到3’端依次排列的如下结构：第一多克隆位点‑弗林蛋白酶切割位点‑V5标签‑Spacer‑2A肽‑第二多克隆位点，其中，“‑”代表连接。
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