[发明专利]检测多菌灵的酶联免疫试剂盒及其应用

摘要

本发明提供了一种检测多菌灵的酶联免疫试剂盒，它包括包被有包被原的酶标板、多菌灵标准品溶液、多菌灵抗体、酶标二抗、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液，所述包被原为多菌灵偶联抗原，所述酶标二抗为酶标记的多菌灵抗抗体。本发明还公开了一种应用上述酶联免疫试剂盒检测多菌灵的方法，它包括首先进行样品前处理，然后用试剂盒进行检测，最后分析检测结果。本发明提供的酶联免疫试剂盒可用于检测烟叶样本中多菌灵的含量，其操作简便、费用低廉、灵敏度高、能够现场监控且适合大量样本的筛查。

主权项

一种检测多菌灵酶联免疫试剂盒的制备方法，其特征在于：包括制备包被有包被原的酶标板、多菌灵标准品溶液、多菌灵抗体、酶标二抗、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液，所述包被原为多菌灵偶联抗原，所述酶标二抗为酶标记的多菌灵抗抗体，所述多菌灵偶联抗原是由多菌灵半抗原与载体蛋白偶联得到，所述多菌灵半抗原的具体制备方法如下：三氟乙酸20 mL 加三氟乙酸酐2 mL，冰水浴，降至0℃，加硝酸铵0.5 g，搅拌1 h，加入含多菌灵1.0 g 的三氟乙酸溶液，继续搅拌，反应2 h；停止反应，加稀氢氧化钠溶液中和到中性，二氯甲烷萃取，水洗，蒸干，乙醚洗涤结晶，得到化合物a 0.76 g，收率67%；化合物a 0.7 g 加乙醇溶解，加0.43 g 氯化锡水溶液10 mL，通入氮气，加入回流反应3 h；停止反应，旋蒸除去乙醇，加乙酸乙酯萃取，浓缩上硅胶柱，石油醚和乙酸乙酯的体积比为1：1洗脱分离，得到半抗原化合物产物0.54 g，收率，83%；所述多菌灵半抗原分子结构式为：。