[发明专利]一种MTHFR基因检测方法及试剂盒

摘要

本发明涉及DNA检测技术领域，提供了一种MTHFR基因检测方法及试剂盒。所述方法包括以下步骤：利用MTHFR基因特异性引物对对待测样本进行PCR扩增，得含待测SNP位点的扩增产物；将步骤A产物直接与接头连接，形成待测序文库分子，并将待测序文库分子通过微球可寻址的固定在固相载体上；利用无荧光标记的寡核苷酸探针替换有荧光标记的寡核苷酸探针，对固定在固相载体上的待测序文库分子进行一次连接测序反应；连接测序获得待测SNP位点的序列信息。本发明还提供了相应的试剂盒。本发明的方法及试剂盒通过封闭待测序文库分子中的非特异性结合位点，降低了测序所得结果中的错误信号，提高了对MTHFR基因检测的准确性。

主权项

1.一种以非疾病诊断为目的的MTHFR基因检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A、利用MTHFR基因特异性引物对对待测样本进行PCR扩增，得含待测SNP位点的扩增产物；B、将含待测SNP位点的扩增产物直接与接头连接，形成待测序文库分子，并将待测序文库分子通过微球可寻址的固定在固相载体上；C、利用无荧光标记的寡核苷酸探针替换有荧光标记的寡核苷酸探针，对固定在固相载体上的待测序文库分子进行一次连接测序反应；D、连接测序获得待测SNP位点的序列信息；所述无荧光标记的寡核苷酸探针与连接测序技术中所使用的有荧光标记的寡核苷酸探针的序列完全相同，所述无荧光标记的寡核苷酸探针序列为(N‑N‑N……‑N)n，所述N为A、G、C或T，n为正整数。