[发明专利]TALENs介导的奶山羊成纤维细胞基因敲除和基因定点插入的方法在审
| 申请号： | 201510978161.2 | 申请日： | 2015-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN106119203A | 公开（公告）日： | 2016-11-16 |
| 发明（设计）人： | 李雪玲;刘慧;刘畅;崔思朋;赵宇航 | 申请（专利权）人： | 内蒙古大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/877;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 010021 内蒙古自治区呼*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明公开了TALENs介导的奶山羊成纤维细胞基因敲除和基因定点插入的方法，其是根据奶山羊CSN2基因序列，获得针对第二外显子的TALENs表达载体，并根据TALENs作用位点设计含有外源基因的且可以整合至宿主基因组中的打靶载体，然后将上述TALENs表达载体和打靶载体共同转入奶山羊成纤维细胞中，获得CSN2基因敲除且定点整合外源基因的细胞。TALENs技术具有实验设计简单准确、实验周期短、成本低、成功率高、脱靶情况少等优点。利用本方法可以快速获得双等位基因整合的细胞克隆，细胞不经过药物筛选，提高了所获得体细胞的核移植和胚胎发育质量，不含有抗性基因，大大简化了生物安全评价。 | ||
| 搜索关键词： | talens 山羊 纤维 细胞 基因 定点 插入 方法 | ||
【主权项】：
TALENs介导的奶山羊成纤维细胞基因敲除和基因定点插入的方法，其特征在于，其是根据奶山羊CSN2基因序列，获得针对第二外显子的TALENs表达载体，并根据TALENs作用位点设计含有外源基因的且可以整合至宿主基因组中的打靶载体，然后将上述TALENs表达载体和打靶载体共同转入奶山羊成纤维细胞中，获得CSN2基因敲除且定点整合外源基因的细胞。
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