[发明专利]一种猪极小胚胎样干细胞培养与鉴定方法在审
| 申请号： | 201510985992.2 | 申请日： | 2015-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN105441386A | 公开（公告）日： | 2016-03-30 |
| 发明（设计）人： | 顾翔;李碧春;顾健;孙加斌;金凯;蒋一秀;罗雪;朱业;孙磊;胡茂志;石青青;朱睿;王竟悟;顾艺荀;苗书航 | 申请（专利权）人： | 江苏省苏北人民医院 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074;C12N5/077;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 225001 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及干细胞培养与鉴定技术领域，尤其涉及一种偶蹄类动物猪极小胚胎样干细胞的培养与鉴定方法，技术内容包括：1.分离同种乳猪成肌细胞并制备成肌细胞饲养层；2.接种分离的猪骨髓极小胚胎样干细胞于成肌细胞饲养层，用RPMI 1640培养基进行培养，并添加细胞因子进行培养扩增极小胚胎样干细胞；3.采用形态学、免疫荧光和基因水平系列鉴定极小胚胎样干细胞。发明提出的极小胚胎样干细胞的高效培养方法和精准的鉴定步骤具有巨大的应用前景，为极小胚胎样干细胞的进一步研究提供了重要的技术保障。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 极小 胚胎 干细胞 培养 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种猪极小胚胎样干细胞的体外培养方法，其特征在于，将分离、纯化后得到的猪骨髓极小胚胎样干细胞接种于铺有成肌细胞饲养层的培养板中，用RPMI 1640培养基进行培养，置于37℃、5% CO2的培养箱中，并添加双抗（青‑链霉素储存液）、白血病抑制因子（LIF）、碱性纤维母细胞生长因子（bFGF）、干细胞因子（SCF）等细胞因子进行培养，每2天更换1次培养液，培养9至11天可以进行传代。
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