[发明专利]利用链转移型引物扩增核酸及融合探针的方法有效
| 申请号： | 201510989564.7 | 申请日： | 2015-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN105506082B | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 杨劲;施军平;娄国强 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 梁寅春 |
| 地址： | 310015 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 合成起始位点多，灵敏度强与特异性强的利用链转移型引物扩增核酸的方法：(a)设计链转移型引物；(b)利用DNA聚合酶的核酸酶活性切割所述链转移型引物，经切割后引物形成链转移，作目标核酸的扩增；该目标核酸从5’末端向3’末端开始依次规定F2区域、F1区域和R1区域，从3’末端向5’末端开始依次规定F2c区域、F1c区域和R1c区域，所述F2与F2c、F1与F1c或R1与R1c区域，指两片段间呈反向互补；所述链转移型引物由R1加上F1片段而成；所述链转移指经上游F3引物介导的片段延伸至F2区域时，DNA聚合酶的外切酶活性切割链转移型引物，使链转移型引物内部的R1片段转移，结合下游R1c区域充当反向引物。本发明适用于核酸扩增。 | ||
| 搜索关键词： | 链转移 引物 目标核酸 引物扩增 转移型 核酸 切割 核酸酶活性 外切酶活性 反向互补 反向引物 核酸扩增 合成起始 特异性强 后引物 灵敏度 切割链 设计链 介导 扩增 探针 位点 融合 上游 延伸 | ||
【主权项】：
1.利用链转移型引物扩增核酸的方法，其特征在于：(a)设计链转移型引物；(b)利用DNA聚合酶的5’→3’外切核酸酶活性切割所述链转移型引物，经切割后引物形成链转移，进行目标核酸的扩增；所述目标核酸，从5’末端向3’末端开始依次规定F2区域、F1区域和R1区域，从3’末端向5’末端开始依次规定F2c区域、F1c区域和R1c区域，所述区域指寡核苷酸片段，所述F2与F2c区域，F1与F1c区域，或R1与R1c区域，指两片段间呈反向互补；所述链转移型引物由R1加上F1片段而成；所述链转移指经上游F2引物介导的片段延伸至F2区域时，DNA聚合酶的外切核酸酶活性切割链转移型引物，经切割产生游离R1片段，使链转移型引物内部的R1片段转移，结合下游R1c区域充当反向引物。
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