[发明专利]一种检测人受体酪氨酸激酶的磷酸化抗体芯片试剂盒

摘要

本发明涉及一种人受体酪氨酸激酶(RTK)的磷酸化抗体芯片试剂盒。本发明所述的检测人RTK的磷酸化抗体芯片试剂盒包括：固相载体，为包被特异性抗体的标准膜片或玻片；洗涤液，包括含0.1％吐温20的20X浓缩洗涤液以及其稀释液；样本稀释液；用于稀释抗体和HRP‑链亲和素的稀释液；生物素化的检测抗体混合物；300X浓缩荧光素‑链亲和素溶液；样本处理液，为2X细胞裂解液；所述特异性抗体是针对71种蛋白质的抗体。本发明所述的RTK磷酸化抗体芯片试剂盒能够通过一次实验迅速、简捷和准确地测定RTK通路中71个蛋白质的磷酸化情况，通过监测实验模型系统中的蛋白磷酸化变化，便能快速检测到细胞中的途径激活作用，而不需要经过繁琐的免疫沉淀法与印迹法。

主权项

1.一种检测人受体酪氨酸激酶的磷酸化抗体芯片试剂盒，其特征在于，包括：/n固相载体为多孔纤维膜，选自：硝酸纤维素膜、纤维过滤膜、聚偏氟乙烯膜或者尼龙膜；/n所述多孔纤维膜是在0.05至0.1％的表面活性剂的表面修饰下或者在强氧化条件下形成亲水基团后在20至26℃，40％湿度条件下与特异性抗体紧密结合的；/n洗涤液，包括含0.1％吐温20的20X浓缩洗涤液以及其稀释液；/n样本稀释液；/n用于稀释抗体和HRP-链亲和素的稀释液；/n生物素化的检测抗体混合物；/n300X浓缩荧光素-链亲和素溶液；/n样本处理液，为包含蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物的RIPA缓冲液，所述磷酸酶抑制剂是选自：Na₃VO₄、NaF；/n其中，所述特异性抗体由针对以下55种蛋白质的抗体组成：ABL1、ACK1、Ax1、Blk、BMX、Btk、Csk、Dtk、EphA1、EphA1、EphA3、EphA4、EphA5、EphA6、EphA7、EphA8、EphB6、FAK、FER、FGFR2α、Fgr、FRK、FYN、Hck、HGFR、IGF-1R、insulin R、Itk、JAK1、JAK2、JAK3、LCK、LTK、Lyn、MATK、M-CSFR、MUSK、NGFR、PDGFR-a、PDGFR-b、PYK2、RET、ROR2、ROS、RYK、SRMS、Tec、Tie-1、Tie-2、TNK1、TRKB、TXK、Tyk2、TYRO10、VEGFR3。/n