[发明专利]一种基于IL-18基因调节武定鸡抗沙门氏菌能力的方法有效
申请号: | 201511016616.9 | 申请日: | 2015-12-29 |
公开(公告)号: | CN105420389A | 公开(公告)日: | 2016-03-23 |
发明(设计)人: | 徐志强;胡文元;谷大海;李琦华;荣华;佟荟全;李正田;曹振辉;刘丽仙;赵筱;豆腾飞;程志斌;林秋叶;贾俊静;葛长荣 | 申请(专利权)人: | 云南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京名华博信知识产权代理有限公司 11453 | 代理人: | 李中强 |
地址: | 650201 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于IL-18基因调节武定鸡抗沙门氏菌能力的方法,属于动物分子育种的基因工程技术领域;所述的基于IL-18基因调节武定鸡抗沙门氏菌能力的方法包括以下具体步骤:1)免疫器官中总RNA的提取;2)RT-PCR引物设计;3)定量检测;4)肌注灭活沙门氏菌,本发明根据IL-18基因的表达对增强免疫能力的影响及抗菌机理,通过测定武定鸡脾脏、胸腺、法氏囊三个组织中IL-18基因的相对表达量,判断武定鸡抗沙门氏菌能力与IL-18基因的相对表达量的关系,IL-18基因的相对表达量高的武定鸡抗沙门氏菌能力强,IL-18基因的相对表达量低的武定鸡抗沙门氏菌能力弱,并且对IL-18基因的相对表达量低的武定鸡进行肌注灭活沙门氏菌,增强武定鸡抗沙门氏菌的能力。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 il 18 基因 调节 武定 沙门氏菌 能力 方法 | ||
【主权项】:
一种基于IL‑18基因调节武定鸡抗沙门氏菌能力的方法,其特征在于:所述的基于IL‑18基因调节武定鸡抗沙门氏菌能力的方法包括以下具体步骤:1)免疫器官中总RNA的提取选取同一批次出壳的武定鸡健康鸡只100只进行隔离饲养,利用RNA提取试剂提取武定鸡免疫器官总RNA,将提取的RNA反转录成cDNA,‑20℃保存;2)RT‑PCR引物设计根据GenBank中武定鸡IL‑18序列信息,利用Primer Premier 5.0设计引物,并合成,合成后进行荧光定量PCR,荧光定量PCR的反应条件为:94℃预变性3min;94℃变性30s,59.2℃退火30s、72℃延伸30s,39个循环;72℃后延伸7min进行扩增;3)定量检测检测武定鸡脾脏、胸腺、法氏囊三个组织中IL‑18基因的相对表达量;4)肌注灭活沙门氏菌对脾脏中IL‑18基因的相对表达量小于2.2或胸腺中IL‑18基因的相对表达量小于3.6或法氏囊中IL‑18基因的相对表达量小于7.0的武定鸡,对其进行肌注灭活沙门氏菌,使得武定鸡脾脏中IL‑18基因的相对表达量不小于2.2,胸腺中IL‑18基因的相对表达量不小于3.6,法氏囊中IL‑18基因的相对表达量不小于7.0,增强武定鸡抗沙门氏菌的能力。
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