[发明专利]小麦3种病毒的多重RT-PCR同步检测技术及应用在审
申请号: | 201511022454.X | 申请日: | 2015-12-30 |
公开(公告)号: | CN105400909A | 公开(公告)日: | 2016-03-16 |
发明(设计)人: | 李向东;魏姣;田延平 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本研究涉及植物病毒检测,提供了一种小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)、中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)及水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)的多重RT-PCR检测技术及其在田间的应用。根据3种病毒的外壳蛋白基因保守序列设计引物,筛选退火温度一致的特异引物,并对PCR的反应体系及扩增条件进行优化建立了通过一次PCR反应中即可检测出3种小麦病毒病害的方法。该技术应用于田间样品的检测,能对这3种病毒的发生情况和危害程度及时预警,为病害防控提供依据。 | ||
搜索关键词: | 小麦 病毒 多重 rt pcr 同步 检测 技术 应用 | ||
【主权项】:
一种涉及小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)、中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)和水稻黑条矮缩病毒(Rice black streaked dwarf virus,RBSDV)的多重RT‑PCR同步检测技术,其特征在于引物序列如Seq ID No.1,Seq ID No.2,Seq ID No.3,Seq ID No.4所示,Taq DNA聚合酶浓度0.025U/μL,dNTP浓度0.25mmol/L,退火温度56℃,延伸时间60s,循环次数30次。该技术灵敏度高,在cDNA稀释1000倍时仍然能检测出3种病毒。
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