[发明专利]一种提取落叶松总RNA的方法在审
申请号: | 201511023641.X | 申请日: | 2015-12-31 |
公开(公告)号: | CN105936902A | 公开(公告)日: | 2016-09-14 |
发明(设计)人: | 冯健;张守攻;齐力旺;孙晓梅 | 申请(专利权)人: | 辽宁省林业科学研究院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 马驰 |
地址: | 辽宁省沈阳*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明属于植物生物技术领域,具体涉及落叶松高质量总RNA的快速提取方法,配制l RNA提取液;往RNase-free离心管中加入的RNA提取液,同时加入PVP、M/ml DTT、β-巯基乙醇和蛋白酶K;取植物材料于液氮中研磨成粉末,震荡混匀;孵育;加入氯仿/异戊醇,涡旋振荡;加入无水乙醇,冰上放置以上;再用75%酒精清洗一次再次离心5min,加入TE;去除总RNA中的DNA;分别用等体积的酚/氯仿/异戊醇和氯仿/异戊醇抽提;抽提后的溶液加入1/10体积NaAc和2倍体积无水乙醇,沉淀用75%乙醇清洗;吸出剩余乙醇;加入适量RNase-free水溶解,得到落叶松总RNA;本发明方法具有较大的实际应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 提取 落叶松 rna 方法 | ||
【主权项】:
一种落叶松总RNA提取方法,其特征在于:将经过液氮研磨后的落叶松原料加入经孵育后的RNA提取液,经过孵育、抽提、沉淀后得到含有DNA的总RNA,再经过DNA去除,抽提,沉淀和溶解后,得到高纯度总RNA。
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