[发明专利]普鲁兰酶变体以及编码它们的多核苷酸

摘要

本发明涉及普鲁兰酶变体，这些普鲁兰酶变体具有升高的热活性并且包括在对应于SEQ ID NO:3的多肽的位置393、143、150、243、244、345、346、368、370、373、381、382、385、387、402、429、430、431、432、456、486、492、610、624、631、632、665以及699的一个或多个位置处对亲本普鲁兰酶的取代。本发明还涉及编码这些变体的多核苷酸；包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体、以及宿主细胞；以及使用这些变体的方法。这些变体主要衍生自来自脱支芽孢杆菌、嗜酸性普鲁兰芽孢杆菌或者杂合普鲁兰酶的普鲁兰酶。

主权项

一种普鲁兰酶变体，其在对应于SEQ ID NO:3的多肽的位置393、143、150、243、244、346、368、370、373、381、385、387、402、429、430、456、486、492、610、631、632、665以及699的一个或多个位置处包含取代，其中该变体具有普鲁兰酶活性，并且；a)其中该变体与SEQ ID NO:3的多肽具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％但小于100％的序列一致性，并且其中与SEQ ID NO:3的普鲁兰酶相比，该变体具有升高的热活性，特别地，当在70℃下测量时，相对于在65℃下的活性该变体具有至少60％的相对活性，更具体地至少65％、更具体地至少70％、更具体地至少60％、更具体地至少75％、更具体地至少80％、更具体地至少90％、更具体地至少100％的相对活性；或b)其中该变体与SEQ ID NO:6的多肽具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％但小于100％的序列一致性，并且其中与SEQ ID NO:6的普鲁兰酶相比，该变体具有升高的热活性，特别地，当在70℃下测量时，相对于在65℃下的活性该变体具有至少30％的相对活性，更具体地至少40％、更具体地至少50％、更具体地至少60％、更具体地至少70％、更具体地至少80％、更具体地至少90％、更具体地至少100％的相对活性；或c)其中该变体与SEQ ID NO:9的多肽具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％但小于100％的序列一致性，并且其中与SEQ ID NO:9的普鲁兰酶相比，该变体具有升高的热活性，特别地，当在70℃下测量时，相对于在65℃下的活性该变体具有至少30％的相对活性，更具体地至少40％、更具体地至少50％、更具体地至少60％、更具体地至少70％、更具体地至少80％、更具体地至少90％、更具体地至少100％的相对活性；或d)其中该变体与SEQ ID NO:16的多肽具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％但小于100％的序列一致性，并且其中与SEQ ID NO:16的普鲁兰酶相比，该变体具有升高的热活性，特别地，当在70℃下测量时，相对于在65℃下的活性该变体具有至少30％的相对活性，更具体地至少40％、更具体地至少50％、更具体地至少60％、更具体地至少70％、更具体地至少80％、更具体地至少90％、更具体地至少100％的相对活性；或e)其中该变体与SEQ ID NO:17的多肽具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％但小于100％的序列一致性，并且其中与SEQ ID NO:17的普鲁兰酶相比，该变体具有升高的热活性，特别地，当在70℃下测量时，相对于在65℃下的活性该变体具有至少30％的相对活性，更具体地至少40％、更具体地至少50％、更具体地至少60％、更具体地至少70％、更具体地至少80％、更具体地至少90％、更具体地至少100％的相对活性。