[发明专利]具有提高的凝乳特性的凝乳酶变体有效

专利信息
申请号: 201580009539.6 申请日: 2015-02-26
公开(公告)号: CN106062187B 公开(公告)日: 2020-09-15
发明(设计)人: 约翰尼斯·马腾·范丹尼布林克;J·L·詹森;J·雅各布森;马丁·伦德;伊本·杰普森;C·杰克尔 申请(专利权)人: 科.汉森有限公司
主分类号: C12N9/64 分类号: C12N9/64;A23K20/189;A23L29/00;A23C9/12;A23C19/04
代理公司: 北京世峰知识产权代理有限公司 11713 代理人: 康健;王思琪
地址: 丹麦霍*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 具有提高的凝乳特性的凝乳酶变体。
搜索关键词: 具有 提高 凝乳 特性 变体
【主权项】:
一种用于制备分离的凝乳酶多肽变体的方法,其包括以下步骤:(a):在具有凝乳酶活性的亲本多肽中的一个或更多个位置处产生改变,其中所述改变包含在至少一个氨基酸位置的替换、缺失或插入,所述至少一个氨基酸位置对应于以下任意位置:70;75;77;79;90;102;103;108;114;117;120;124;134;154;156;163;212;222;223;224;238;246;256;261;K279V;L280;F281;R300D、E、S、T、N、Q、C、U、G、P、A、V、I、L、M、F、Y、W;G309;R312D、E、S、T、N、Q、C、U、G、P、A、V、I、L、M、F、Y、W;320;324;D325Q;326;331;336;346;361;367和379;以及(b):生产并分离步骤(a)的经改变多肽,从而获得所述分离的凝乳酶多肽变体,其中所述变体具有凝乳酶活性;并且其中:(i):所述亲本多肽的氨基酸位置是通过所述亲本多肽与SEQ ID NO:1(牛凝乳酶)的多肽的比对来确定的—即SEQ ID NO:1的多肽被用来确定所述亲本多肽的对应氨基酸序列;且(ii):所述亲本多肽与SEQ ID NO:1(牛凝乳酶)的成熟多肽具有至少65%序列同一性,所述成熟多肽为SEQ ID NO:1的第59位氨基酸至第381位氨基酸;并且前提是所述分离的凝乳酶多肽变体不是选自由以下组成的组的特定变体:Q246E+G309D+S329P+D337E;R125Q+G128N+H204R+Q246E+S284T;Y185F+R213Q+Q246E;V261A+V263I+G309W+L311I+Y326F;G128D+L188I+Y326F;G128N+R312S+S313Y+Y326F;G128N+R312S+S313Y+Y326F;D117N+V261A+R312S;D216S+L224V+V263I+F281V+G309D;Y79S+L224V+L311I;和R119S+L224V+T297S。
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