[发明专利]使用特异性抗体检测蛋白质修饰的方法

摘要

用于分析被分析物的修饰的方法、试剂盒和组合物，其使用与不同染料相连的修饰位点特异性抗体结合被分析物的目标特异性修饰位点，同时使用特异于未经修饰的被分析物的抗体（其与另一种染料结合）以测定所述被分析物浓度，用于对相同样品中的经修饰的被分析物进行定量。

主权项

用于检测待分析样品的被分析物中的蛋白质或多肽的修饰位点的方法，所述样品包含所述蛋白质或多肽，其中所述修饰位点选自磷酸化、自磷酸化、甲基化、羟基化、糖基化、泛素化、乙酰化、异戊烯化、酰胺化或N末端甲硫氨酸检测，所述方法包括：（a）提供第一捕获抗体，所述第一捕获抗体特异于所述修饰位点或与之结合，并且所述第一捕获抗体与充当检测标记物的染料缀合或相连，以及（b）提供第二抗体，所述第二抗体特异于所述蛋白质上的位点或表位或与之结合，所述位点或表位不同于所述修饰位点，并且所述第二抗体与可区别于步骤（a）的所述染料的检测标记物缀合或相连，（c）提供第三捕获抗体，所述第三捕获抗体特异于如（a）中所用的另一个修饰位点或与之结合，并且所述第三捕获抗体与充当可区别于步骤（a）和（b）的所述染料的检测标记物的染料缀合或相连。