[发明专利]用于加工DNA底物的改进方法有效
申请号: | 201580017244.3 | 申请日: | 2015-01-30 |
公开(公告)号: | CN106459968B | 公开(公告)日: | 2020-02-21 |
发明(设计)人: | V·马卡洛夫;J·拉利伯特 | 申请(专利权)人: | 斯威夫特生物科学股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 杨昀;陶家蓉 |
地址: | 美国密*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明描述了将衔接体连接至片段化的双链DNA分子的端部的方法。这种新方法克服了向DNA片段的5’端添加磷酸基团的需要。相反,5’末端碱基由于DNA的物理片段化而被破坏。通过去除破坏的碱基,具有5’磷酸的连接相容性碱基暴露并且衔接体连接效率恢复,导致从减少的输入DNA量构建文库的能力和文库产量显著增加。 | ||
搜索关键词: | 用于 加工 dna 改进 方法 | ||
【主权项】:
一种组合物,其包含:连接酶和第一多核苷酸,所述第一多核苷酸是至少部分双链的且包含寡核苷酸1和寡核苷酸2;其中,寡核苷酸1包含5’磷酸和位于其3’末端的封闭基团;并且其中,寡核苷酸2(i)包含易于降解的碱基,和/或(ii)可通过非变性热条件被置换,并且还包含位于其3’末端的封闭基团,所述封闭基团阻止寡核苷酸1的3’端的连接但允许5’端的连接。
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