[发明专利]突变酶及使用所述突变酶的类萜的制备方法

摘要

本发明的目的在于能够有效地生产有用的类萜化合物，特别在于提供一种作为类萜的重要中间体的角鲨烯的制备方法。所述课题可通过本发明的甲羟戊二酸单酰CoA还原酶得到解决，所述甲羟戊二酸单酰CoA还原酶含有：甲羟戊二酸单酰CoA还原酶(HMGR)的(a)Sα2氨基酸序列中第10位的丙氨酸(A)以外的氨基酸、(b)HMG‑CoA结合位点的DKK区域的C末端开始的第1位的脯氨酸(P)以外的氨基酸、(c)Lα2氨基酸序列中第1位的丙氨酸(A)以外的氨基酸、及(d)Lα2氨基酸序列中第6位的谷氨酸(E)以外的氨基酸。

主权项

1.一种甲羟戊二酸单酰CoA还原酶，其具有选自以下的氨基酸序列：(1)序列号1所表示的氨基酸序列的514位～1022位的氨基酸序列；(2)序列号41所表示的氨基酸序列的531位～1054位的氨基酸序列，其中Sα2氨基酸序列的第10位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，HMG‑CoA结合位点的DKK区域的C末端开始的第1位的氨基酸被替换为丙氨酸(A)，Lα2氨基酸序列的第1位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，且Lα2氨基酸序列的第6位的氨基酸被替换为天冬酰胺(N)，Sα2氨基酸序列的第7位的氨基酸被替换为亮氨酸，Lα2氨基酸序列的第5位的氨基酸被替换为苏氨酸，Sα2氨基酸序列的第6位的氨基酸被替换为亮氨酸；(3)序列号1所表示的氨基酸序列的514位～1022位的氨基酸序列，其中Lα2氨基酸序列的第5位的氨基酸被替换为异亮氨酸；(4)序列号1所表示的氨基酸序列的514位～1022位的氨基酸序列，其中Sα2氨基酸序列的第6位的氨基酸被替换为丙氨酸；(5)序列号1所表示的氨基酸序列的514位～1022位的氨基酸序列，其中Sα2氨基酸序列的第7位的氨基酸被替换为异亮氨酸；(6)序列号41所表示的氨基酸序列的531位～1054位的氨基酸序列，其中Sα2氨基酸序列的第10位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，HMG‑CoA结合位点的DKK区域的C末端开始的第1位的氨基酸被替换为丙氨酸(A)，Lα2氨基酸序列的第1位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，且Lα2氨基酸序列的第6位的氨基酸被替换为天冬酰胺(N)，Sα2氨基酸序列的第7位的氨基酸被替换为亮氨酸，Lα2氨基酸序列的第5位的氨基酸被替换为苏氨酸；(7)序列号41所表示的氨基酸序列的531位～1054位的氨基酸序列，其中Sα2氨基酸序列的第10位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，HMG‑CoA结合位点的DKK区域的C末端开始的第1位的氨基酸被替换为丙氨酸(A)，Lα2氨基酸序列的第1位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，且Lα2氨基酸序列的第6位的氨基酸被替换为天冬酰胺(N)，Sα2氨基酸序列的第7位的氨基酸被替换为亮氨酸；(8)序列号41所表示的氨基酸序列的531位～1054位的氨基酸序列，其中Sα2氨基酸序列的第10位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，HMG‑CoA结合位点的DKK区域的C末端开始的第1位的氨基酸被替换为丙氨酸(A)，Lα2氨基酸序列的第1位的氨基酸被替换为丝氨酸(S)，且Lα2氨基酸序列的第6位的氨基酸被替换为天冬酰胺(N)，Sα2氨基酸序列的第7位的氨基酸被替换为亮氨酸，Sα2氨基酸序列的第6位的氨基酸被替换为亮氨酸。