[发明专利]HbA1c的酶促测定

摘要

本发明涉及一种确定糖化血红蛋白(HbA1c)的量的方法，其中，如果需要，样品中的红细胞溶血，并且如果需要，之后释放的血红蛋白与蛋白水解剂接触并且对通过这种方式或其他方式产生的糖化血红蛋白降解产物进行定量。为了提供具有足够的反应必要的化学化合物稳定性性质的可用于此的过程和试剂，提出了提供无活性蛋白酶形式的必需蛋白水解剂，其然后仅在原位再活化。在本发明的具体实施方式中，为了使在1‑3范围的非常低的pH下解折叠的血红蛋白稳定化，溶血溶液中应该存在至少一种合适的稳定剂，并且，在其中无色染料与确定HbA1c的量结合使用的本发明的实施方式中，根据本发明，提出了后者可用特定膦化合物和/或含硫化合物稳定化。

主权项

1.一种确定样品中糖化血红蛋白(HbA1c)的量的方法，其中进行以下方法步骤：a)使所述样品中的红细胞溶血以释放其中含有的HbA1c，b)使方法步骤a)中释放的HbA1c接触蛋白水解剂，用于产生糖化血红蛋白降解产物；并且c)通过对方法步骤b)中产生的糖化血红蛋白降解产物进行定量来确定HbA1c的量其特征在于，方法步骤b)中使用的蛋白水解剂如下产生，其中，使至少两种不同溶液与方法步骤a)中释放的HbA1c接触，其中一种溶液的pH值范围是1‑8，并且含有i)金属蛋白酶，ii)每1000kU/l的金属蛋白酶中0.1至2mmol/l的针对二价金属离子的螯合剂，和iii)0.5至10mmol/l Ca2+或0.5至10mmol/l Mg2+，其中螯合剂:Ca2+或螯合剂:Mg2+的摩尔比的范围是1:2‑1:20，并且另一种溶液含有100至5000μmol/l的选自Fe2+、Mn2+、Co2+和Zn2+的二价金属离子。