[发明专利]驯养的大型动物的受精卵中的靶向基因组编辑在审

专利信息
申请号: 201580024317.1 申请日: 2015-03-26
公开(公告)号: CN106459951A 公开(公告)日: 2017-02-22
发明(设计)人: B·P·V·L·特卢古;K-E·朴 申请(专利权)人: 马里兰大学派克分院
主分类号: C12N15/00 分类号: C12N15/00;C12N15/85
代理公司: 永新专利商标代理有限公司72002 代理人: 左路;区斌
地址: 暂无信息 国省代码: 美国;US
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摘要: 提供一种利用位点特异性同源整合的靶向基因组编辑方法。将包含单链寡核苷酸或双链核酸分子(其包含所关注的核酸分子和靶基因座切割位点两侧的序列)的组合物连同核酸酶和将核酸酶靶向至靶基因座的指导核酸分子注射入动物的受精卵。在受精之后和核形成之前将组合物注射入受精卵。将所关注的核酸分子高效重组入基因组。所述方法允许将核酸分子整合入其中在注射期间不可以视觉上观察原核的动物的基因组。
搜索关键词: 驯养 大型 动物 受精卵 中的 靶向 基因组 编辑
【主权项】:
一种动物基因组的靶向基因编辑方法,所述方法包括:a)通过受精动物卵母细胞和动物精子产生包含所述动物的所述基因组的受精卵;b)将一个或多个载体的组合物注射入所述受精卵,所述组合物包含:i.核酸酶;ii.至少一种将所述核酸酶靶向至靶基因座处的所述基因组的靶基因的指导核酸分子;iii.包含所关注的异源核酸分子(NOI)的单链寡核苷酸或双链核酸分子;iv.与所述靶基因座上游的第一侧翼序列同源的序列以及包含所述靶基因座下游的第二侧翼序列的第二序列;c)在所述受精卵细胞形成单核之前将所述组合物注射入所述细胞;d)所述核酸酶在所述动物基因组的所述靶基因的所述靶基因座处引入双链断裂;以及e)所述NOI重组入所述动物基因组的所述靶基因的所述靶基因座。
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