[发明专利]用于原位合成的探针阵列的寡核苷酸探针倒转方法有效
| 申请号： | 201580027347.8 | 申请日： | 2015-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN106460232B | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 格伦·麦克加尔;维贾伊·辛格 | 申请（专利权）人： | 生捷科技控股公司 |
| 主分类号： | C40B50/18 | 分类号： | C40B50/18 |
| 代理公司： | 11262 北京安信方达知识产权代理有限公司 | 代理人： | 郑霞 |
| 地址： | 开曼群*** | 国省代码： | 开曼群岛;KY |
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| 摘要： | 本发明涉及用于在原位合成的阵列中倒转寡核苷酸探针的方法。这些方法可用于将探针相对于基底的取向由3'结合的倒转为5'结合的。这些方法也可用于从原位合成的阵列中减少或消除截短的探针序列的存在。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 原位 合成 探针 阵列 寡核苷酸 倒转 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于原位合成的阵列的探针倒转方法，其包括：/n(a)提供基底；/n(b)将分支连接体偶联至所述基底，其中所述分支连接体包含(i)包含合成后反应性基团的第一分支，和(ii)第二分支；/n(c)将可切割连接体偶联至所述第二分支；/n(d)以3′到5′取向在所述可切割连接体上合成寡核苷酸，所述寡核苷酸包含(i)通过所述可切割连接体偶联至所述第二分支的3′末端，以及(ii)偶联至第一OH基团的5′末端；/n(e)使所述第一OH基团发生反应以提供偶联至所述寡核苷酸的所述5′末端的环化基团；/n(f)通过将所述环化基团与所述合成后反应性基团进行反应而使所述寡核苷酸发生环化，从而使所述寡核苷酸的所述5′末端偶联至所述第一分支；以及/n(g)切割所述可切割连接体，从而使所述寡核苷酸的所述3′末端从所述第二分支上解偶联；/n其中所述环化基团包含叠氮基，且所述合成后反应性基团包含炔，并且其中所述步骤(f)中的环化是通过硫酸铜[II]、抗坏血酸钠和作为配体的三-三唑基胺的水溶液催化的。/n
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