[发明专利]用于快速制备减活RNA病毒的方法在审
| 申请号： | 201580033015.0 | 申请日： | 2015-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN106574253A | 公开（公告）日： | 2017-04-19 |
| 发明（设计）人： | A·努加雷德;L·德法布里图斯;F·奥布里;X·德朗巴勒瑞;E·A·古德 | 申请（专利权）人： | 埃克斯-马赛大学;国家医疗保健研究所 |
| 主分类号： | C12N7/04 | 分类号： | C12N7/04;C12N15/40;A61K35/76;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所11256 | 代理人： | 孟凡宏,谢燕军 |
| 地址： | 法国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明利用诱变的力量在非常短期内制备减活RNA病毒，即只要靶标病毒的完整序列已知且可以制备感染性基因组。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 快速 制备 rna 病毒 方法 | ||
【主权项】：
用于制备减活RNA病毒的方法，包括以下步骤：步骤I)通过用编码相同氨基酸的另一个核苷酸密码子随机替换感染性RNA病毒的整个病毒基因组的一部分核苷酸密码子来重编码所述感染性RNA病毒的病毒基因组，前提是：i)所述病毒基因组中存在的稀有核苷酸密码子的数量和位置不变，所述稀有核苷酸密码子是CGU、CGC、CGA、CGG、UCG、CCG、GCG和ACG；和ii)涉及RNA二级结构的所述病毒基因组的区域不变；步骤II)通过以下制备减活RNA病毒：子步骤II.a)在步骤I)所得的重编码的病毒基因组的5’位引入DNA依赖性RNA聚合酶的启动子，和任选地在3’位引入终止子和RNA聚腺苷酸序列；子步骤II.b)在至少2个、优选至少3个、4个、5个或6个重叠cDNA片段中扩增子步骤a)制备的重编码的病毒基因组，其包括所述启动子和任选的所述终止子和RNA聚腺苷酸序列；子步骤II.c)将所述cDNA片段转染入宿主细胞；子步骤II.d)孵育子步骤c)的所述宿主细胞；和子步骤II.e)从所述孵育的宿主细胞回收感染性RNA病毒。
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