[发明专利]通过不对称扩增确定初始模板浓度的定量方法有效
申请号: | 201580034600.2 | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN106536757B | 公开(公告)日: | 2020-07-17 |
发明(设计)人: | 本·科布 | 申请(专利权)人: | 艾皮斯托姆有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 陈晓娜 |
地址: | 英国曼*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 描述的是用于在核酸扩增反应中定量核酸的方法,其中对样品进行不对称核酸扩增反应,从而在反应的初始阶段产生双链核酸产物,并且一旦限制性引物耗尽,在反应的后续阶段产生单链核酸产物。然后通过解链曲线分析的方式检测产生的双链核酸产物和单链核酸产物的相对量。然后可以基于双链产物峰高度与单链产物峰高度的比例将双链产物峰高度与单链产物峰高度的比例用于定量起始模板的量。 | ||
搜索关键词: | 通过 不对称 扩增 确定 初始 模板 浓度 定量 方法 | ||
【主权项】:
用于在核酸扩增反应中定量核酸的方法,所述方法包括:提供模板核酸和第一和第二扩增引物,其中所述第一引物以有限的量存在;在合适的条件下进行不对称核酸扩增反应,从而在反应的初始阶段产生双链核酸产物,并且一旦限制性引物耗尽,在反应的后续阶段产生单链核酸产物;提供对所述单链核酸产物特异的探针,并让所述探针与单链产物杂交;一旦反应完成后续阶段,通过解链曲线分析的方式检测产生的双链核酸产物和单链核酸产物的相对量;确定双链产物峰高度与单链产物峰高度的比例是否小于1;并且如果所述比例小于1,则基于双链产物峰高度与单链产物峰高度的比例定量起始模板的量。
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