[发明专利]用于将分子有效递送到细胞的具有脂质聚集体的组合物和方法

摘要

本发明提供具有至少两种阳离子脂质以及一种或任选地超过一种非阳离子脂质的脂质聚集体组合物，其用于将包括核酸，尤其DNA和RNA以及蛋白质的生物活性分子活体外和/或活体内递送到细胞和组织中。还提供使用本发明化合物将生物活性分子递送到细胞和组织中以促进其中靶蛋白表达的方法。在一些非限制性实施例中，本发明脂质聚集体组合物可用于递送核酸分子以促进涉及细胞重编程和基因组编辑应用的蛋白质的表达。

主权项

一种脂质聚集体，其包含第一阳离子脂质和至少一种第二阳离子脂质、第一中性脂质以及任选地第二中性脂质，其中所述脂质聚集体适用于在水性条件下与核酸形成阳离子复合物，其中所述第一和第二阳离子脂质彼此不同，且其中所述第一和第二阳离子脂质中的每一种具有以下结构：和其盐；其中：R1和R2独立地是具有8到30个碳原子的烷基、烯基或炔基；具有8到30个碳原子且任选地经醇、氨基醇、胺、酰胺、醚、聚醚、酯、硫醇、烷硫基或氨基甲酰基中的一个或多个取代的烷基、烯基或炔基，或其中R1是‑(CH2)q‑N(R6)tR7R8；R3和R4独立地是氢，或具有8到30个碳原子且任选地经醇、氨基醇、胺、酰胺、醚、聚醚、酯、硫醇、烷硫基或氨基甲酰基中的一个或多个取代的烷基、烯基或炔基；R5‑R8独立地是氢，或烷基、烯基或炔基；R9是氢，或烷基、烯基或炔基，碳水化合物或肽；r、s和t是1或0以指示所指定的R基团存在或不存在，当r、s或t中的任一个是1时，所指定的R基团所连接的氮带正电荷，且其中r、s或t中的至少一个是1；q是介于1到6范围内的整数(包括端点)；Xv—是阴离子，其中v是阴离子的价数且A是阴离子的数目；L是能够共价连接两个氮的二价有机自由基，选自：(CH2)n，其中n是介于1到10范围内的整数(包括端点)，其任选地经一个或多个ZR10基团取代，其中Z是O或S，且R10是氢或烷基、烯基或炔基；或{‑(CH2)k‑Y‑(CH2)m}p‑，其中k和m独立地是介于1到10范围内的整数(包括端点)，且p是介于1到6范围内的整数(包括端点)，且Y是O、S、CO、COO、CONR11、NR11CO或NR11COR11N，其中R11与任何其它R11独立地是氢或烷基；其中R1‑R10的烷基、烯基或炔基的一个或多个CH2基团可以经O、S、S‑S、CO、COO、NR12CO、NR12COO或NR12CONR12替换，其中R12与任何其它R12独立地是氢或烷基、烯基或炔基；且其中R1‑R12的烷基、烯基或炔基任选地经一个或多个OR13、CN、卤素、N(R13)2、肽或碳水化合物基团取代，其中R13与其它R13独立地是氢或烷基、烯基或炔基，且其中当以烷基形式存在时，R3和R4中的至少一个经OR13和N(R13)2基团两者取代。