[发明专利]脱氢酶活性提高的阿马多里酶在审
| 申请号： | 201580057464.9 | 申请日： | 2015-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN107148475A | 公开（公告）日： | 2017-09-08 |
| 发明（设计）人： | 钺阳介;小松﨑爱里;一柳敦 | 申请（专利权）人： | 龟甲万株式会社 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12M1/40;C12N9/06;C12N9/08;C12Q1/26;G01N27/327;G01N27/416 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司11262 | 代理人： | 李平,郑霞 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明提供一种不易受氧气浓度影响的阿马多里酶及使用该阿马多里酶的HbA1c测定方法和测定试剂盒。即通过在选自由来源于锥毛壳属(Conichaeta)等的阿马多里酶的280位、267位、269位、54位和241位构成的组的位置所对应位置上取代1个或1个以上的氨基酸残基而得到的阿马多里酶、以及使用该阿马多里酶的HbA1c测定方法、测定试剂盒和传感器。本发明的修饰阿马多里酶具有降低的氧化酶活性和提高的脱氢酶活性，可以利用电子媒介体，降低氧气浓度的影响，能够高灵敏度地测定HbA1c。 | ||
| 搜索关键词： | 脱氢酶 活性 提高 阿马多里酶 | ||
【主权项】：
一种阿马多里酶，其为氧化酶活性相对于脱氢酶活性的比率(OX/DH)与修饰前的阿马多里酶相比发生降低的修饰阿马多里酶，所述修饰阿马多里酶为如下的阿马多里酶：(i)在将阿马多里酶的氨基酸序列与序列号1中记载的氨基酸序列进行比对时，序列号1所示的氨基酸序列中选自由280位、267位、269位、54位和241位构成的组的位置所对应位置的1个以上的氨基酸被取代，且具有脱氢酶活性的阿马多里酶；(ii)所述(i)的阿马多里酶中，序列号1所示的氨基酸序列中280位、267位、269位、54位和241位所对应位置以外的位置的1个或更多个氨基酸由被取代、缺失或添加的氨基酸序列组成，且具有脱氢酶活性的阿马多里酶；(iii)所述(i)的阿马多里酶中，该阿马多里酶的全长氨基酸序列与序列号1、序列号3、序列号6、序列号9、序列号10、序列号11、序列号44、序列号53或序列号67的氨基酸序列有70％以上的序列同源性，由序列号1的第10位～32位、36～41位、49～52位、54～58位、63～65位、73～75位、84～86位、88～90位、120～122位、145～150位、156～162位、164～170位、180～182位、202～205位、207～211位、214～224位、227～230位、236～241位、243～248位、258～261位、266～268位、270～273位、275～287位、295～297位、306～308位、310～316位、324～329位、332～334位、341～344位、346～355位、357～363位、370～383位、385～387位、389～394位、405～410位和423～431位的氨基酸序列组成的同源性区域中的氨基酸序列与该阿马多里酶的对应位置的同源性区域中的氨基酸序列有90％以上的序列同源性，且具有脱氢酶活性的阿马多里酶；或者(iv)所述(i)的阿马多里酶中，该阿马多里酶的全长氨基酸序列与序列号1、序列号3、序列号6、序列号9、序列号10、序列号11、序列号44、序列号53或序列号67的氨基酸序列有80％以上的序列同源性，且具有脱氢酶活性的阿马多里酶。
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