[发明专利]采用NS3捕获肽的受试者抗HCV抗体检测测定

摘要

本发明提供了使用NS3捕获肽用于检测样品中的受试者抗HCV抗体的方法、试剂盒和组合物。在某些实施方案中，一起采用了至少两种NS3解旋酶（NS3h）捕获肽和至少两种缀合肽（例如NS3h缀合肽），其允许在一步式测定中的受试者抗体检测的宽动态范围。在其他实施方案中，提供了在不使用还原剂的情况下检测NS3特异性受试者抗体的方法。在一些实施方案中，NS3特异性受试者抗体用NS3缀合肽‘双击’进行检测（例如，在洗涤之前和之后均添加缀合肽至样品中）。

主权项

一种检测受试者中的丙型肝炎病毒（HCV）感染的方法，其包括：a）使初始生物样品与第一NS3h捕获肽和第二NS3h捕获肽以及第一可检测标记的缀合肽和第二可检测标记的缀合肽接触，以生成包含所述初始生物样品、所述第一NS3h捕获肽和第二NS3h捕获肽以及所述第一缀合肽和第二缀合肽的混合生物制品，其中所述第一NS3h捕获肽和第二NS3h捕获肽：i）各自包含编码至少一种HCV NS3解旋酶表位的氨基酸序列；和ii）具有不同的氨基酸序列，其中所述初始生物样品被怀疑含有受试者抗体，并且其中所述受试者抗体在所述生物样品中不是纯化形式，b）在这样的条件下温育所述混合的生物样品，所述条件使得：所述第一NS3h捕获肽特异性结合所述受试者抗体中的至少一种，以形成第一捕获复合物，并且所述第一缀合肽结合所述第一捕获复合物中的所述受试者抗体，以形成第一可检测复合物，和所述第二NS3h捕获肽特异性结合所述受试者抗体中的至少一种，以形成第二捕获复合物，并且所述第二缀合肽结合所述第二捕获复合物中的所述受试者抗体，以形成第二可检测复合物；c）洗涤所述混合的生物样品，以生成经洗涤的样品；和d）检测所述第一可检测复合物和/或第二可检测复合物的存在，从而检测所述受试者中的过去或现有HCV感染的存在，其中与仅使用所述第一NS3h捕获肽或第二NS3h捕获肽相比，在所述混合的生物样品中所述第一NS3h捕获肽和第二NS3h捕获肽两者的存在扩展了用于定性检测所述受试者抗体的动态范围。