[发明专利]用于检测人类BCR-ABL融合基因T315I突变的引物、探针及试剂盒

摘要

本发明公开了用于检测人类BCR‑ABL融合基因T315I突变的引物、探针和试剂盒，其中引物和探针包括突变上游ARMS引物AM1‑F和突变下游引物AW1‑R，以及检测探针AW1‑P和阻断探针AW1‑B。由其组成的试剂盒还可以包括外控引物和探针，以及内控引物和探针。本发明采用特异性突变引物和探针阻断技术，可以准确地检测人类BCR‑ABL融合基因T315I突变，特异性水平高，在高野生型基因背景下也能检出低含量突变序列，试剂盒使用方法简单，检测快速，结果易读，灵敏度高，可实现50拷贝突变基因的稳定检出；特异性好，20ng野生型基因组DNA无非特异性扩增，检测能力高达1％。

主权项

1.用于检测人类BCR‑ABL融合基因T315I突变的试剂盒，其特征在于，用于检测人类BCR‑ABL融合基因T315I突变的引物和探针，核苷酸序列如下：突变上游ARMS引物AM1‑F：SEQ ID NO:1，突变下游引物AW1‑R：SEQ ID NO:2，检测探针AW1‑P：SEQ ID NO:3，阻断探针AW1‑B：SEQ ID NO:4；其中，检测探针核苷酸序列5’端标记有荧光基团FAM，3’端标记有淬灭基团MGB；阻断探针的核苷酸序列5’端经过双脱氧修饰，3’端标记有淬灭基团MGB；还包括外控引物和探针，核苷酸序列如下：外控上游引物AR‑F：SEQ ID NO:5，外控下游引物AR‑R：SEQ ID NO:6，外控检测探针AR‑P：SEQ ID NO:7，外控检测探针核苷酸序列的5’端标记有FAM，3’端标记有MGB；还包括内控引物和探针，核苷酸序列如下：内控上游引物IC‑F：SEQ ID NO:8，内控下游引物IC‑R：SEQ ID NO:9，内控检测探针IC‑P：SEQ ID NO:10，内控检测探针核苷酸序列的5’端标记有JOE，3’端标记有BHQ1。