[发明专利]从大豆中提取叶酸的方法

摘要

本发明属于植物提取物的制备领域，具体地涉及一种大豆种子中叶酸的提取方法。人类和动物不能自身合成叶酸，各种作物是人类和动物获取这一维生素的主要来源。作物中叶酸的提取，常用的有单酶法和三酶法。不同食物中使用的三酶法提取条件是不同的，有必要对每种类型食物分别进行叶酸提取的优化。本发明提供了一种优化的从大豆种子中提取叶酸的方法，利用本方法，可以同时对上百个样品同时进行提取，使提取过程快捷高效。

主权项

从大豆中提取叶酸的方法，包括以下步骤：(1)大豆样品制备：大豆种子粉碎获取豆粉，称取0.2g豆粉，置于AXYGEN EP管中，在样品中加入750μL叶酸提取缓冲液，95℃孵育15min置于冰上冷却，加入5mm钢珠2粒，在组织研磨机中研磨样品，获得样品匀浆液；(2)大豆叶酸提取：在步骤(1)样品匀浆液中加入8μLα‑淀粉酶和750μL叶酸提取缓冲液以避免粘稠，室温放置10min，加入100μL蛋白酶，37℃孵育1h；100℃煮沸10min，冰上迅速冷却10min；在4℃，14000rpm条件下，离心10min；吸取上清，按照2％的体积比在上清中加入大鼠血清10μL，混匀后，于37℃培养2h；100℃煮沸灭活10min，冰上迅速冷却10min；在4℃，14000rpm条件下，离心15min；吸取上清分装于灭菌管中直接测定或冻存于‑80℃，得大豆叶酸提取液，叶酸提取缓冲液成分：50mM磷酸缓冲液，PH＝6.5，1％抗坏血酸钠盐，0.1％2‑巯基乙醇。