[发明专利]用于检测CYP2C19基因分型的引物对、荧光探针、试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种用于检测CYP2C19基因分型的试剂盒，通过设计特异性引物对和荧光探针来检测CYP2C19基因的CYP2C19*2(681G/A)和CYP2C19*3(636G/A)等位基因分型。本发明采用不对称PCR与荧光探针熔解曲线分析技术相结合，通过特定温度的熔解峰来判断不同基因型，可在单管PCR反应中实现与CYP2C19*2、CYP2C19*3相关的6种基因分型检测，无需后续处理，最大限度避免了反应产物污染的可能性，且操作简单、耗时短、特异性好、准确率高，结果易判读。

主权项

1.一种用于检测CYP2C19基因分型的引物对及荧光探针，所述引物对包括用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对和/或用于扩增CYP2C19*3基因的特异性引物对；其中，所述用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对包括一条正向引物CYP2C19*2‑F和一条反向引物CYP2C19*2‑R，所述正向引物CYP2C19*2‑F具有序列表中SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，所述反向引物CYP2C19*2‑R具有序列表中的SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列；所述用于扩增CYP2C19*3基因的特异性引物对包括一条正向引物CYP2C19*3‑F和一条反向引物CYP2C19*3‑R，所述正向引物CYP2C19*3‑F具有序列表中SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，所述反向引物CYP2C19*3‑R具有序列表中的SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列；所述荧光探针包括用于检测CYP2C19*2基因的荧光探针CYP2C19*2‑P和/或用于检测CYP2C19*3基因的荧光探针CYP2C19*3‑P；其中，所述荧光探针CYP2C19*2‑P具有序列表中的SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列；所述荧光探针CYP2C19*3‑P具有序列表中的SEQ ID NO：6所示的核苷酸序列；所述荧光探针为在5′末端区域具有荧光基团，在3′末端区域具有淬灭基团的双标记探针。