[发明专利]GFP-Addnd3’UTR重组表达载体及其构建方法与应用在审
申请号: | 201610016901.9 | 申请日: | 2016-01-12 |
公开(公告)号: | CN106591362A | 公开(公告)日: | 2017-04-26 |
发明(设计)人: | 李创举;杨晓鸽;危起伟;岳华梅;叶欢 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院长江水产研究所 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/66;C12N15/89;C12N15/12;C07K14/46 |
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地址: | 430000 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种GFP‑Addnd 3’UTR重组表达载体,其载体为表达载体pCS2+,其上连接有达氏鲟dnd基因的3’UTR片段和绿色荧光蛋白编码区基因。本发明的GFP‑Addnd3’UTR重组表达载体可以用于标记达氏鲟原始生殖细胞,具体标记方法为体外合成GFP‑Addnd 3’UTR重组表达载体的mRNA,然后通过显微注射的方式注入达氏鲟胚胎发育1‑cell期的胚胎中,然后进行孵化培养,并实时观察不同发育时期绿色荧光蛋白的表达情况。由于Addnd为母源性的基因,且仅在卵巢和精巢中表达,因此,采用本发明的标记方法后,在受精卵发育过程中可检测到绿色荧光蛋白的表达,从而有利于跟踪原始生殖细胞的迁移发育和进一步深入的科学研究。 | ||
搜索关键词: | gfp addnd3 utr 重组 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种GFP‑Addnd 3’UTR重组表达载体,其特征在于:其载体为表达载体pCS2+,其上连接有达氏鲟dnd基因的3’UTR片段和绿色荧光蛋白编码区基因;所述达氏鲟dnd基因的3’UTR片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;所述绿色荧光蛋白编码区基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
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