[发明专利]一种鲤个体间半同胞、全同胞以及父母本亲缘关系鉴定方法

摘要

本发明公开了一种鲤个体间半同胞、全同胞以及父母本亲缘关系鉴定的方法，它包括开发鲤微卫星标记、设计引物；提取鲤样品的尾部鳍条基因组DNA；用微卫星标记的引物对鲤微卫星位点进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；对所述PCR扩增产物进行电泳检测；用遗传学软件对鲤个体间半同胞、全同胞以及父母本亲缘关系进行鉴定。本发明方法能够快速、准确地对鲤个体间半同胞、全同胞以及父母本亲缘关系进行鉴定，弥补现有技术的不足，可以应用于鲤亲本选配及遗传育种研究领域。

主权项

一种鲤个体间半同胞、全同胞以及父母本亲缘关系鉴定方法，其特征在于，其步骤如下：（1）用磁珠富集法开发鲤微卫星标记，通过PCR扩增从多个微卫星标记中筛选出多态性高、扩增效率好的引物，选取12对微卫星标记的引物用于后续的鲤个体间亲缘关系分析，所述的12对微卫星标记的引物如下所示：JL325引物对：F：cctgacacctgccgttcaR：tcctctgttctgcctccaJL368引物对：F：caggaggacgtaagggaaR：agggctgaggagtgatgagJL382引物对：F：tccctctgcccaatgacaR：cggtgagcgagaaacgagJL458引物对：F：gaaaggagttcccacaacR：agctgaggacctagacgtJL930引物对：F：agatttcgtctaccaaggaR：cttccacctgagacaacacJL1211引物对：F：tcctgcatctgagtgacagaR：cagacattagccgggtaggcJL1285引物对：F：ttgacgacagcgttagcattR：aacaagcgcaggctaatcagJL1301引物对：F：acacacctgcgctcactaagR：ttgtgtttcaggctacaaaaaJL1316引物对：F：aaacacagccagacatgcaaR：tgcttcaaatcaatccacaaaJL1410引物对：F：ctgagctgagctcgtgtctgR：ttttctgccgaaacattgtgJL1438引物对：F：ctgcccgacatcaacaagtgR：catgcaaagtgcaaggacatJL1458引物对：F：tgctttattgtgtccctccaR：cacagcacgagcagaggaag；（2）取待鉴别的鲤，处死后取尾部鳍条，采用碱裂解法提取其基因组DNA；（3）以上述基因组DNA为模板，用上述微卫星标记的引物对鲤微卫星位点进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；（4）对上述PCR扩增产物进行电泳检测，检测结果以扩增片段长度bp显示；（5）用常规遗传分析软件对上述检测结果进行分析，鉴定个体间进行半同胞、全同胞以及父母本间的亲缘关系。